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基于高效液相技术的STING激动剂环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立
| 专利名称： | 基于高效液相技术的STING激动剂环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立 |
| 摘要： | 本发明属于医药生物领域，涉及基于高效液相技术的STING激动剂环二核苷酸cGAMP定量检测方法的建立。本发明的目的在于建立一种稳定、操作简便、检测时间短、灵敏度高的反相高效液相色谱法的检测方法，以实现对2’,3’‑cGAMP的定量检测。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 首都医科大学附属北京儿童医院 |
| 发明人： | 梅冬;路肖 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2023-08-29T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2023-11-28T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN202311090632.7 |
| 公开号： | CN117129596A |
| 代理机构： | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 王为 |
| 分类号： | G01N30/02;G01N30/88;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/88 |
| 申请人地址： | 100045 北京市西城区南礼士路56号 |
| 主权项： | 1.一种反相高效液相定量检测2’,3’-cGAMP的方法，其特征在于，包括以下步骤： 取待测样品，以高效液相色谱法对待测样品进行检测，色谱条件为： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相A为15～50mM三乙基乙酸铵缓冲液(TEAA)，pH＝6.2～8.2； 流动相B为乙腈溶液(ACN)； 流动A和流动相B一定的比例进行梯度程序：在0～20min内，流动相A由100％降至87％，流动相B由0升至13％；在20～23min内，流动相A由87％降至60％，流动相B由13％升至40％；在23～25min内，流动相A由60％恢复至起始100％，流动相B由40％降至0；在25～35min内，流动相A保持100％，流动相B保持0。 2.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，流动相的流速为0.5～1.2mL/min，进样量为20μL。 3.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，柱温为25～40℃。 4.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，检测波长为230～290nm。 5.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂选择Agilent ZORBAX SB-C18柱，柱长为250mm，柱内径为4.6mm，柱粒度为5μm。 6.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器。 7.根据权利要求1所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，所述的待测样品为标准品溶液和供试品溶液。 8.根据权利要求7所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，所述的标准品溶液按照以下方法配制得到：称取2’,3’-cGAMP标准品配制成200ug/mL浓度的溶液，依次稀释成40、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/mL浓度的标准品溶液。 9.根据权利要求7所述的2’,3’-cGAMP的高效液相检测方法，其特征在于，所述的供试品溶液为：取2’,3’-cGAMP的纳米制剂，使用超滤管离心，取上下层溶液，过滤，即得供试品溶液。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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