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原文传递微孔测定板及相关方法

专利名称：	微孔测定板及相关方法
摘要：	一种微孔板，其包括：以二维阵列排列的多个孔，所述孔各自包括：底表面，从底表面延伸以形成开口顶部的侧壁；以及底表面中的至少两个子孔，所述至少两个子孔具有在孔的底表面下方延伸的侧壁，其中所述至少两个子孔各自包含配置为与样品中的靶分析物(如果存在的话)结合的捕获结合剂。将样品加入孔中，使得样品流体接触所述至少两个子孔中的每一个，使得靶分析物(如果存在的话)与所述至少两个子孔中的一个或多个中的捕获结合剂结合，其中样品中的标记的缀合物(例如，上转换纳米颗粒(UCNP)标记的缀合物)与靶分析物(如果存在的话)结合。检测在所述至少两个子孔中的一个或多个处的标记的缀合物的标记(例如，UCNP)，以由此确定样品中是否存在靶分析物。
专利类型：	发明专利
申请人：	沃拉克有限公司
发明人：	T·科皮迈基;M·塞拉宁;V·维克莱宁
专利状态：	有效
申请日期：	2022-02-01T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-21T00:00:00+0800
申请号：	CN202280025737.1
公开号：	CN117098997A
代理机构：	中国专利代理(香港)有限公司
代理人：	罗文锋;林毅斌
分类号：	G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/543
申请人地址：	芬兰土尔库
主权项：	1.一种检测靶分析物和/或执行空间多重化测定的方法，所述方法包括：提供包括以下的微孔板：以二维阵列排列的多个孔，所述孔各自包括：底表面，从底表面延伸以形成开口顶部的侧壁；所述底表面中的至少两个子孔，所述至少两个子孔具有在孔的底表面下方延伸的侧壁，其中所述至少两个子孔各自包含配置为与样品中的靶分析物如果存在的话结合的捕获结合剂；将样品加入孔中，使得样品流体接触所述至少两个子孔中的每一个，使得靶分析物如果存在的话与所述至少两个子孔中的一个或多个中的捕获结合剂结合，其中样品中的上转换纳米颗粒(UCNP)标记的缀合物与靶分析物如果存在的话结合；和检测在所述至少两个子孔中的一个或多个处的上转换纳米颗粒(UCNP)标记的缀合物的标记，以由此确定所述样品中是否存在靶分析物。 2.权利要求1的方法，其中所述捕获结合剂包含在所述至少两个子孔的不同子孔中的至少第一捕获结合剂和第二捕获结合剂。 3.权利要求2的方法，其中所述UCNP标记的缀合物包含第一UCNP标记的缀合物和第二UCNP标记的缀合物，其被配置为结合与所述至少两个子孔中的第一捕获结合剂和第二捕获结合剂分别结合的相应靶分析物。 4.权利要求3的方法，其中所述第一UCNP标记的缀合物和所述第二UCNP标记的缀合物的UCNP是相同的UCNP，并且检测在所述至少两个子孔中的一个或多个处的标记缀合物的标记，以由此确定所述样品中是否存在靶分析物，包括基于所述至少两个子孔中的哪些发出来自UCNP标记的缀合物的信号来确定第一靶分析物和第二靶分析物是否存在。 5.权利要求4的方法，其中检测在所述至少两个子孔中的一个或多个处的所述UNCP标记的缀合物的UNCP标记包括将光子撞击到所述至少两个子孔上，使得所述UCNP标记的缀合物发出信号。 6.权利要求5的方法，其进一步包括基于来自所述UCNP标记的缀合物的信号的信号强度来确定所述靶分析物的浓度，其中所述信号具有对应于样品中的所述靶分析物如果存在的话的浓度的信号强度。 7.权利要求6的方法，其中所述第一捕获结合剂和所述第二捕获结合剂中的至少一种包含对照捕获结合剂，并且所述第一捕获结合剂和所述第二捕获结合剂中的另一种包含测试捕获结合剂，其中相对于与对照捕获结合剂结合的UCNP标记的缀合物的信号强度，与测试捕获结合剂结合的UCNP标记的缀合物的信号强度对应于样品中的所述靶分析物如果存在的话的浓度。 8.权利要求6的方法，其中基于来自UCNP标记的缀合物的信号的信号强度来确定所述靶分析物的浓度是基于实际经验的基于经验的模型。 9.权利要求1的方法，其中所述捕获结合剂包含结合对的第一半，并且所述捕获结合剂经由结合对的第一半与所述至少两个子孔的表面上的结合对的第二半的结合，与所述至少两个子孔的表面结合。 10.权利要求1的方法，其中在将所述样品加入所述孔中之前，所述上转换纳米颗粒(UCNP)标记的缀合物存在于所述孔的底部和/或侧面上。 11.权利要求1的方法，其进一步包括将所述上转换纳米颗粒(UCNP)标记的缀合物加入所述样品中。 12.权利要求1的方法，其中所述靶分析物是人绒毛膜促性腺激素(hCG)。 13.权利要求1的方法，其中所述靶分析物是胎盘生长因子(PlGF)。 14.一种微孔板，其包括：以二维阵列排列的多个孔，所述孔各自包括：底表面，从底表面延伸以形成开口顶部的侧壁；所述底表面中的至少两个子孔，所述至少两个子孔具有在孔的底表面下方延伸的侧壁，并且经设定大小和经配置，使得加入孔内的样品流体接触所述至少两个子孔中的每一个，其中所述至少两个子孔各自包含配置为与样品中的靶分析物如果存在的话结合的捕获结合剂，其进一步被配置为与所述至少两个子孔中的上转换纳米颗粒(UCNP)标记的缀合物结合。 15.权利要求14的微孔板，其中所述捕获结合剂包含在所述至少两个子孔的不同子孔中的至少第一捕获结合剂和第二捕获结合剂。 16.权利要求15的微孔板，其中所述UCNP标记的缀合物包含第一UCNP标记的缀合物和第二UCNP标记的缀合物，其被配置为结合与所述至少两个子孔中的第一捕获结合剂和第二捕获结合剂分别结合的相应靶分析物。 17.权利要求16的微孔板，其中所述第一UCNP标记的缀合物和所述第二UCNP标记的缀合物的UCNP是相同的，并且所述微孔板被配置为由阅读器进行分析，所述阅读器基于所述至少两个子孔中的哪些发出来自UCNP的信号来确定第一靶分析物和第二靶分析物是否存在。 18.权利要求17的微孔板，其中所述至少两个子孔中的一个或多个处的UNCP标记的缀合物被配置为通过将光子撞击到所述至少两个子孔上，使得所述UCNP标记的缀合物发出信号而进行检测。 19.权利要求18的微孔板，其中所述微孔板经配置，使得基于来自UCNP标记的缀合物的信号的信号强度来确定靶分析物的浓度，其中所述信号具有对应于样品中的靶分析物如果存在的话的浓度的信号强度。 20.权利要求19的微孔板，其中所述第一捕获结合剂和所述第二捕获结合剂中的至少一种包含对照捕获结合剂，并且所述第一捕获结合剂和所述第二捕获结合剂中的另一种包含测试捕获结合剂，其中相对于与对照捕获结合剂结合的UCNP标记的抗体的信号强度，与测试捕获结合剂结合的UCNP标记的抗体的信号强度对应于样品中的所述靶分析物如果存在的话的浓度。 21.权利要求20的微孔板，其中基于来自UCNP标记的缀合物的信号的信号强度的所述靶分析物的浓度是基于实际经验的基于经验的模型。 22.权利要求14的微孔板，其中所述捕获结合剂包含结合对的第一半，并且所述捕获结合剂经由结合对的第一半与所述至少两个子孔的表面上的结合对的第二半的结合，与所述至少两个子孔的表面结合。 23.权利要求16的微孔板，其中所述上转换纳米颗粒(UCNP)标记的缀合物存在于所述孔的底部和/或侧面上。
所属类别：	发明专利