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1.一种肝脏X受体alpha(liver X receptor alpha,LXR-α)激动剂(agonist)
的筛选方法,其步骤包含:
(a)构建一种表达质粒,该表达质粒至少包括肝脏X受体alpha配体结
合区域(LXR-αligand binding domain)的序列、GAL-4脱氧核糖核酸结合区
域(DNA binding domain)的序列、可受该GAL-4脱氧核糖核酸结合区域辨识
的GAL-4上游启动序列(GAL-4 upstream activation sequence)以及可受该
GAL-4上游启动序列调控的报告基因(reporter gene);
(b)将该表达质粒转染(transfect)至宿主细胞;
(c)在该宿主细胞培养基中加入待测样品;
(d)检测培养基中该报告基因的表达量;
(e)对比加入该待测样品时的该报告基因的表达量与未加入该待测样品
时的该报告基因的表达量;以及
(f)当步骤(e)中该待测样品的该报告基因的表达量高于未加入该待测
样品的该报告基因的表达量,则表示该待测样品含有可与肝脏X受体alpha配
体结合区域相结合的配体(ligand),并判定该待测样品为可活化肝脏X受体
alpha的激动剂。 |