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原文传递 一种胶原蛋白端肽的检测方法
专利名称: 一种胶原蛋白端肽的检测方法
摘要: 本发明公开了一种胶原蛋白端肽的检测方法,包括步骤:(1)样品处理与电泳;(2)蛋白转印;(3)封闭与孵育:取步骤(2)所得转印膜,放入封闭液中震荡;然后加入胶原蛋白端肽抗体对转印膜进行一抗孵育,之后加入二抗进行孵育;(4)显色反应:取步骤(3)二抗孵育后的转印膜,加入显色溶液显色,至条带出现,再加入蒸馏水以终止显色反应,根据所得条带判断待测样品中胶原蛋白端肽的类型。本发明提供了一种能有效定性的、半定量的检测外源性胶原蛋白中端肽含量的方法,为外源性胶原蛋白基生物产品的免疫原性检测提供方法依据。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 广东;44
申请人: 广州创尔生物技术股份有限公司
发明人: 梁健华;赖俏荣;李奕恒
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810440528.9
公开号: CN108872585A
代理机构: 广州三环专利商标代理有限公司 44202
代理人: 宋静娜;郝传鑫
分类号: G01N33/68(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68
申请人地址: 510000 广东省广州市高新技术产业开发区香山路17号A栋4层1号
主权项: 1.一种胶原蛋白端肽的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)样品处理与电泳:将待测样品与SDS缓冲液混合均匀后,离心,获得上清样品;取所述上清样品进行SDS‑PAGE电泳,电泳完毕后回收,得到目的凝胶;(2)蛋白转印:将硝酸纤维素膜、滤纸和步骤(1)所得的凝胶在转膜缓冲溶液中平衡20~30分钟,之后进行转膜,得到转印膜;(3)封闭与孵育:取步骤(2)所得转印膜,放入封闭液中震荡;然后加入胶原蛋白端肽抗体对转印膜进行一抗孵育,之后加入二抗进行孵育;(4)显色反应:取步骤(3)二抗孵育后的转印膜,加入显色溶液显色,至条带出现,再加入蒸馏水以终止显色反应,根据所得条带判断待测样品中胶原蛋白端肽的类型。
所属类别: 发明专利
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