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一种口蹄疫病毒3B蛋白抗体的ELISA检测方法及试剂盒
| 专利名称： | 一种口蹄疫病毒3B蛋白抗体的ELISA检测方法及试剂盒 |
| 摘要： | 本发明公开了一种口蹄疫病毒3B蛋白抗体的ELISA检测方法及试剂盒，该试剂盒包括3B蛋白包被的检测板、工作浓度的兔抗牛HRP酶标抗体、阴性对照、阳性对照、TMB显色液、1N盐酸。本发明可准确、快速检测出动物血清中3B抗体有无，用于检测动物血清中口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗体，适用于动物群体感染状况监测和评估、发现早期隐性感染和进出境检疫，不受血清型的限制。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 新疆;65 |
| 申请人： | 新疆畜牧科学院兽医研究所 |
| 发明人： | 魏婕;魏玉荣;苗书魁;汪萍;郭会玲;米晓云;薛英;王延;马文戈;黄炯;薛晶 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810160047.2 |
| 公开号： | CN108387741A |
| 代理机构： | 西安研创天下知识产权代理事务所(普通合伙) 61239 |
| 代理人： | 杨凤娟 |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I;G01N33/543(2006.01)I;G01N33/577(2006.01)I;G01N33/535(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/577;G01N33/535 |
| 申请人地址： | 830011 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市冬融街726号 |
| 主权项： | 1.一种口蹄疫病毒3B蛋白抗体的ELISA检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、以含O型Akesu/58‑2毒株3B基因的pCAGGS‑3B质粒为模板,扩增3B蛋白基因,并克隆至pET‑30a(+)载体,进行原核表达及纯化；分别以Akesu/58‑2型口蹄疫病毒、纯化的3B蛋白为抗原；步骤2、将3B标准蛋白用0.05mol/l pH9.5的碳酸盐溶液CBS稀释成1.5mg/ml,4℃16h包被酶标板,封闭液为含1%明胶;根据待测样品数量取出所需酶标板并标记对照孔和样品孔,样品孔加入工作浓度的兔抗牛HRP酶标抗体和待测病毒培养液各100ul，对照孔加PBST，4℃孵育24h后移入酶标板上相应的孔中,37℃孵育45min后用PBST洗3次;步骤3、每个样品孔加入工作浓度的酶标二抗, 37℃孵育45min,PBST洗5次后加入底物,室温反应10min,加入终止液终止反应；用酶标仪读取各孔OD值;结果判定,根据各样品的B/Bo在标准曲线上求出其对应的质量浓度,或代入回归方程计算样品质量浓度的对数值X,求其反对数,即为样品中所含3B蛋白的质量浓度。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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