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原文传递一种检测茶叶中草铵膦和草甘膦药物残留量的方法

专利名称：	一种检测茶叶中草铵膦和草甘膦药物残留量的方法
摘要：	本发明公开了一种检测茶叶中草铵膦和草甘膦药物残留量的方法，主要由提取、净化、衍生和定量定性分析四个步骤组成；选用氢氧化钠作为提取溶液；HCl调节酸度，经PSA净化，氯甲酸（9‑芴甲基）酯(FMOC‑Cl)衍生化，选择5 mmol/L甲酸铵/甲醇+5 mmo/L甲酸铵水溶液（V:V）梯度洗脱，正离子多反应监测（MRM）测定，外标法定量。本发明能同时测定茶叶中草铵膦和草甘膦药物除草剂残留量，简化样品净化步骤、节省前处理时间和耗材成本，适用于大批量的样品分析，高效、准确、重复性好、灵敏度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	贵州;52
申请人：	杨梅
发明人：	杨梅;孙思;王安波;刘文锋;汪俭;潘承丹
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810281233.1
公开号：	CN108445133A
代理机构：	贵阳东圣专利商标事务有限公司 52002
代理人：	袁庆云
分类号：	G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/88
申请人地址：	556000 贵州省黔东南苗族侗族自治州凯里市文化北路20号农检中心
主权项：	1.一种检测茶叶中草铵膦和草甘膦药物残留量的方法，包括以下步骤：（1）茶叶按GB/T8303经粉碎过筛,制得待测茶样；（2）样品的提取精密称取1±0.01g茶叶样品，置于50 mL离心管中，加入10 mL 0.02 mol/L‑0.07 mol/L NaOH溶液，涡旋混匀1 min；室温水浴振荡提取20 min，经10000 r/min离心5 min，上清液用滤纸过滤至10 mL离心管中，得提取液Ⅰ；（3）样品的净化取2mL提取液Ⅰ加入0.5 mol/L ‑2mol/L HCl溶液20μL，涡旋混匀后10000r/min离心5min取上清液得提取液Ⅱ，将取液Ⅱ倒入预先称好0.2gPSA的10mL离心管中，并立即涡旋混匀，10000r/min离心5min取上清液得提取液Ⅲ；（4）待测液制备取提取液Ⅲ1mL置于10mL离心管中，加入0.2mL的40g/L‑60g/L硼酸钠缓冲溶液，摇匀后再加入0.2mL 10g/L‑30g/L的氯甲酸（9‑芴甲基）酯衍生试剂，涡旋混匀振摇后37℃静置过夜10h‑16h，衍生后的样品经10000r/min离心5min后，过水系0.22μm滤膜，得待测液；(5)配制基质匹配标准衍生混标溶液将空白样品经步骤（1）至步骤（3）处理，用该空白样品提取液在质量浓度为0.005μg/mL‑0.50μg/mL范围内，配制至少五个浓度的草铵膦和草甘膦系列基质匹配标准混标溶液，采用与步骤（4）相同的方法对各浓度混标溶液进行衍生，制得系列基质匹配标准衍生混标溶液；（6）液相色谱‑串联质谱法测定a)仪器参数①色谱参数：采用2.1mm×100 mm、1.8 μm的超高效液相 HSS T3色谱柱；柱温40 ℃；样品温度20℃；进样量1 μL；梯度洗脱程序为：流速保持0.4 mL/min不变,在0‑0.5min时，流动相5 mmol/L甲酸铵/甲醇溶液的体积比例从10%变为20%，流动相5 mmo/L甲酸铵水溶液的体积比例从90%变为80%；在0.5‑2.5min时，流动相5 mmol/L甲酸铵/甲醇溶液的体积比例从20%变为95%，流动相5 mmo/L甲酸铵水溶液的体积比例从80%变为5%；在2.5‑4.0min时，流动相5 mmol/L甲酸铵/甲醇溶液的体积比例为95%，流动相5 mmo/L甲酸铵水溶液的体积比例为5%，且二者均保持不变；在4.0‑4.1min时，流动相5 mmol/L甲酸铵/甲醇溶液的体积比例从95%变为10%，流动相5 mmo/L甲酸铵水溶液的体积比例从5%变为90%；在4.1‑5.0min时，流动相5 mmol/L甲酸铵/甲醇溶液的体积比例为10%，流动相5 mmo/L甲酸铵水溶液的体积比例为90%,且二者均保持不变；②质谱参数：采用电喷雾离子源；正离子扫描，多反应监测，脱溶剂氮气温度500 ℃、流速1000 L/Hr，离子源温度150 ℃，锥孔气流量50 L/Hr，毛细管电压3.0kV，碰撞气为氩气；草铵膦衍生物的母离子为404，子离子分别为136、179和208，锥孔电压V为25，碰撞能量eV为25、10和10，其中m/z 404>136为定量离子对；草甘膦衍生物的母离子为392，子离子为88、179和214，锥孔电压V为25，碰撞能量eV为20、10和10，其中m/z 392>88为定量离子对；b)定性分析在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的衍生后待测液中目标化合物色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定性离子必须出现至少应包括一个母离子和两个子离子，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度比与浓度相当的标准溶液相比，其相对偏差不超过30%，则可判断该样品中存在该目标化合物，若上述两个条件不能同时满足，则判断不含该种目标化合物；c）定量分析采用步骤（5）中的系列基质匹配标准衍生混标溶液进行三重四级杆超高效液相色谱串联质谱仪测定，以溶液质量浓度为横坐标，其峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；在相同检测条件下，将步骤（4）的待测液经三重四级杆超高效液相色谱串联质谱仪扫描检测，测得待测液中草铵膦、草甘膦衍生物的峰面积，代入标准曲线，得到待测液中草铵膦和草甘膦残的质量体积浓度（μg/mL），然后采用下述算式计算茶叶中草甘膦、草铵膦的的残留量：式中：X —— 样品中待测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C ——进样溶液中待测组分的色谱峰由标准曲线所获得的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V—— 用于衍生化反应的提取溶液体积，单位为毫升（mL）；f ——样液稀释因子，为10；1000 ——换算系数；m ——试样的称样量，单位为克（g）。
所属类别：	发明专利