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一种改进型鸡蛋中甲硝唑快速测定方法
| 专利名称： | 一种改进型鸡蛋中甲硝唑快速测定方法 |
| 摘要： | 本发明涉及食品检测领域，具体关于一种改进型鸡蛋中甲硝唑快速测定方法；本发明方法公开的一种改进型鸡蛋中甲硝唑快速测定方法，本发明是针对鸡蛋这个体系，利用市售的试剂盒检测鸡蛋的甲硝唑含量，其特征在于：本方法增加酶解操作和匀浆机一个装置，并使用一种蛋白吸附剂对残留的微量蛋白质进行吸附，减小蛋白残留对检测的影响。在对操作修改后，可以在鸡蛋检测时实现超出原测试灵敏度的结果，实现与质谱相近的检测限，通过样品处理过程的针对性改变，可以提高测试的灵敏度和重现性。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 苏州欧福蛋业股份有限公司 |
| 发明人： | 谢良;朱建 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810609738.6 |
| 公开号： | CN108663507A |
| 分类号： | G01N33/53(2006.01)I;G01N33/535(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/53;G01N33/535 |
| 申请人地址： | 215215 江苏省苏州市汾湖高新技术产业开发区金家坝社区金贤路386号 |
| 主权项： | 1.一种改进型鸡蛋中甲硝唑快速测定方法，其技术方案如下：步骤一、取去壳鸡蛋样品、均质；称取均质后鸡蛋样品2g放置于干净离心管中，加入1mL 1X样品提取液，然后加入0.1‑0.5ml中性蛋白酶酶液(1.0%‑1.5%)，先在40‑50℃水浴30‑50min，然后在85‑95℃水浴处理5‑10min；步骤二、向处理好的样品加入3.5‑5.5mL的乙腈和0.15‑0.35g的蛋白吸附剂，初步混匀，然后用高速匀浆机，于9000‑10000rpm下匀浆40‑60s；然后在20‑25℃，使用3500‑4000r/min的转速离心250‑300s；步骤三、移取2mL上清液到一个新的离心管中，将溶剂除去，加入0.3‑0.7mL 样品稀释液和0.8‑1.2mL 正己烷溶解干燥物，最大速涡流40‑60s，溶解均匀；然后在20‑25℃， 使用3500‑4000r/min的转速离心250‑300s；弃去上层正己烷，取50μL下层液作检测；步骤四、分别加入50μL的标准品和样品于各自所设定的孔中，在每孔中加入100μL 1x酶标记物，轻敲微孔板边缘混匀40‑60s；然后在20‑25℃避光孵育45min；步骤五、洗板3次，每次加入250μL 1×洗液，最后一次使板尽量甩干并在吸水纸上吸干；加入TMB底物100 μl，轻敲微孔板边缘混匀40‑60s，在20‑25℃避光孵育30min，加入100 μL的终止液终止反应；步骤六、用无绒布擦拭除去微孔底部的水分和指痕，尽快在450nm下读OD值。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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