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原文传递 牦牛肉中17种氨基酸含量的测定方法
专利名称: 牦牛肉中17种氨基酸含量的测定方法
摘要: 本发明公开了牦牛肉中17种氨基酸含量的测定方法,包括有以下步骤:1)配制缓冲液;2)配制茚三酮溶液;3)配制冷冻剂;4)配制水解液;5)制备混合标准贮备液;6)牦牛肉样品前处理;7)氨基酸含量分离检测。本发明的有益效果为:本发明提供的牦牛肉中17种氨基酸含量的测定方法,能够具体明了测定牦牛肉中氨基酸含量的方法,具有操作简便快速、结果准确可靠、测定时间方面限制较小的优点,同样适用于其他肉类。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 甘肃;62
申请人: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
发明人: 李维红;杨晓玲;高雅琴;熊琳;席斌;杜天庆
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810367055.4
公开号: CN108845042A
代理机构: 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249
代理人: 陆菊华
分类号: G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06
申请人地址: 730000 甘肃省兰州市七里河区小西湖硷沟沿335号
主权项: 1.牦牛肉中17种氨基酸含量的测定方法,其特征在于,包括有以下步骤:1)配制缓冲液:a)分别配制pH2.2、pH3.3、pH4.0和pH6.4的柠檬酸钠Na3C6H5O7.2H2O缓冲液;b)配制pH5.2的乙酸锂溶液;2)配制茚三酮溶液:取150ml二甲基亚砜C2H6OS和乙酸锂溶液50ml加入4g水合茚三酮C9H4O3.H2O和0.12g还原茚三酮C18H10O6.2H2O搅拌至完全溶解即可;3)配制冷冻剂:将市售食盐与冰按质量比1:3的比例混合即可;4)配制水解液:取优级纯的浓盐酸与水按照体积比1:1混合均匀,即得到所需的6mol/L的水解液;5)制备混合标准贮备液:准确吸取17种氨基酸的混标液0.2ml,加入1.3ml的样品贮备液,制备得到混合标准贮备液;6)牦牛肉样品前处理:采集海北牦牛肉、大通牦牛肉样品各20份,将样品粉碎后置于硫酸纸上精密称取0.2000g,放入水解管中,用移液管加入6mol/L的步骤4)配制的水解液10ml,置于步骤3)配制的冷冻剂中10min,用真空泵抽真空并封口后置于110℃烘箱中水解22小时;取出水解好的样品,将其置于室温下至冷却至室温;将水解管中的液体移出,用蒸流水反复冲洗水解管,将所有的液体移出后,定容在100ml容量瓶中,再用滤纸过滤定容好的液体,吸取10ml过滤液用旋转蒸发仪蒸干,加入10ml样品稀释液,经0.45μmol的滤膜过滤,即得到前处理后的牦牛肉样品;7)氨基酸含量分离检测:色谱柱规格为LCAK06/Na4.6×200mm,柱温为74/58℃,流动相为:步骤1)步骤a)中配制的pH3.3、pH4.0和pH6.4的柠檬酸钠Na3C6H5O7.2H2O缓冲液,步骤1)步骤b)中配制的pH5.2的乙酸锂溶液和步骤2)中配制的茚三酮溶液,流动相流率为0.45ml/min,准确吸取0.200ml17种氨基酸混合标准品,置入1.5ml进样瓶中,加入1.3ml样品稀释液,此上机测定用的氨基酸标准稀释液浓度为0.333mmol/ml,用全自动氨基酸分析仪以外标法测定试样测定牦牛肉样品中的17种氨基酸含量;同时还需进行精密度试验和稳定性试验。
所属类别: 发明专利
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