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原文传递一种液质联用测定血浆中赛洛多辛及KMD-3213G浓度的方法

专利名称：	一种液质联用测定血浆中赛洛多辛及KMD-3213G浓度的方法
摘要：	本发明公开了一种液质联用测定血浆中赛洛多辛和KMD‑3213G浓度的方法，采用液质联用系统测定，先取待测样品，加入一定量的混合有机溶剂进行萃取两次，预处理后，经色谱柱分离，用质谱检测器检测。本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，为赛洛多辛和KMD‑3213G的血药浓度测定提供依据；本方法的血浆标准曲线赛洛多辛定量范围为0.2～60ng/mL，KMD‑3213G定量范围为0.2～40ng/mL，批内和批间精密度RSD均小于±15％，适合于测定血浆中赛洛多辛和KMD‑3213G的浓度。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	徐州佳生医药科技有限公司
发明人：	林明弘
专利状态：	有效
申请号：	CN201811451020.5
公开号：	CN109541109A
代理机构：	徐州市淮海专利事务所 32205
代理人：	李妮
分类号：	G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	221000 江苏省徐州市泉山区软件园路6号徐州软件园1号楼C座701室
主权项：	1.一种液质联用测定血浆中赛洛多辛和KMD‑3213G浓度的方法，其特征在于：血浆样品经预处理后经高效液相色谱‑串联质谱检测其浓度，具体方法包括以下步骤：(1)血浆样品预处理：血浆以K2EDTA为抗凝剂，以赛洛多辛‑d4为内标；于96深孔板中精密加入200uL的血浆样品，加入10uL的体积比为1：1的乙腈水溶液，混匀后加入10uL的0.05ng/uL的内标赛洛多辛‑d4溶液，混匀后加入500uL乙腈于96深孔板中，涡旋混合1min，于20℃以3000rpm离心10min，取上层清液150uL至装有350uL混合有机溶剂的96深孔板中，混合有机溶液为水：甲酸：1M醋酸铵按照体积比100：0.1：0.1混合得到的混合物，涡旋混匀，于20℃以3000rpm离心5min后作为测试样品待检测；(2)试样测定：取15uL测试样品注入高效液相色谱‑串联质谱仪中，检测样品中赛洛多辛、KMD‑3213G和内标赛洛多辛‑d4的色谱峰，并据此计算所述血浆样品中的赛洛多辛和KMD‑3213G浓度；(3)液相色谱测定，条件为：色谱柱：Agilent ZORBAX XDB‑C18，5um，柱规格为50×2.1mm；色谱柱温：40℃；流动相A：水/甲酸/1M醋酸铵的体积百分比为100/0.1/0.1；流动相B：乙腈/水/甲酸/1M醋酸铵的体积百分比为85/15/0.1/0.1；洗液：乙腈/水的体积百分比为50/50；自动进样器温度为15℃；梯度洗脱，流速为0.4mL/min，进样量为15uL，分析时间3.5min；(4)质谱测定，条件为：离子源为电喷雾离子源，喷雾电压为5000V，雾化温度为450℃，喷雾气压力为40Psi，辅助加热气压力为40Psi，气帘气压力为20Psi，碰撞气压力为Low，去簇电压分别为60eV的赛洛多辛和赛洛多辛‑d4，去簇电压为40eV的KMD‑3213G；碰撞室入口电压分别为10eV的赛洛多辛和赛洛多辛‑d4，碰撞室入口电压为7eV的KMD‑3213G；碰撞电压分别为35eV的赛洛多辛、KMD‑3213G和赛洛多辛‑d4；碰撞室出口电压分别为14eV的赛洛多辛和赛洛多辛‑d4，碰撞室出口电压为12eV的KMD‑3213G；正离子方式检测；扫描方式为多重反应监测；用于定量分析的离子反应分别为：m/z496.3→m/z200.1，其为赛洛多辛；和m/z672.4→m/z479.2，其为KMD‑3213G；和m/z500.3→m/z200.1，其为赛洛多辛‑d4。
所属类别：	发明专利