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原文传递 非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒
专利名称: 非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒
摘要: 本发明涉及免疫检测技术领域,公开了一种非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒,包括微流控芯片、稀释液、10×洗涤液、酶标抗体、化学发光底物、阳性对照血清以及阴性对照血清,微流控芯片包括依次连通的进样区、样本处理区、检测区和出样区;进样区上设有定量环,进样区通过定量环与样本处理区连通;检测区包括阳性对照区、空白对照区和反应区;微流控芯片还包括缓冲溶液池和洗涤液池以及加药池,缓冲溶液池和洗涤液池分别与样本处理区连通,加药池与检测池连通。本发明将微流控芯片用于检测非洲猪瘟病毒,操作简单、检测快速、成本低廉的优点,而且,本发明得到的试剂盒的灵敏度高,特异性强,亲和力高,不会与其它传播病毒发生血清交叉学反应。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 浙江;33
申请人: 杭州艾替捷英科技有限公司
发明人: 王贵仙;方彩莲
专利状态: 有效
申请日期: 2019-04-30T00:00:00+0800
发布日期: 2019-08-02T00:00:00+0800
申请号: CN201910362151.4
公开号: CN110082527A
代理机构: 浙江杭知桥律师事务所
代理人: 王梨华;陈丽霞
分类号: G01N33/569(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 310000 浙江省杭州市余杭区余杭街道数云路33号4幢607室
主权项: 1.非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒,包括微流控芯片(1)、稀释液、10×洗涤液、酶标抗体、化学发光底物、阳性对照血清以及阴性对照血清,其特征在于:微流控芯片(1)包括依次连通的进样区(11)、样本处理区(12)、检测区(13)和出样区(14);进样区(14)上设有定量环(15),进样区(14)通过定量环(15)与样本处理区(12)连通;检测区(13)包括阳性对照区(131)、阴性对照区(133)、空白对照区(132)和反应区(134),阳性对照区(131)内包被有鼠抗猪IgG抗体,空白对照区(132)内包被有pH=7.8的PBS缓冲液,阴性对照区(133)内包被有非洲猪瘟病毒重组抗原,反应区(134)内包被有非洲猪瘟病毒重组抗原,样本处理区(12)分别与阳性对照区(131)、阴性对照区(133)、空白对照区(132)和反应区(134)连通,样本处理区(12)与出样区(14)连通,出样区(14)上设有排空阀(16);微流控芯片(1)还包括缓冲溶液池(17)和洗涤液池(18)以及加药池(19),缓冲溶液池(17)内设有用于处理样本的稀释液,洗涤液池(18)内设有用于处理样本的10×洗涤液,缓冲溶液池(17)和洗涤液池(18)分别与样本处理区(12)连通,加药池(19)与检测区(11)连通;阳性对照血清为重组蛋白VP73和p54分别免疫猪获得的血清,阴性对照血清为非免疫健康猪血清,酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的鼠抗猪IgG抗体,化学发光底物为鲁米诺。 2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒,其特征在于:稀释液为含5%(v/v)的细胞裂解液的PBS缓冲液,pH=7.8。 3.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒,其特征在于:10×洗涤液为含0.5%(v/v)Tween-20的PBS缓冲液,pH=7.8。 4.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒,其特征在于:重组蛋白VP73血清的获得方式为:将非洲猪瘟病毒的VP73基因插入到原核载体pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导重组蛋白表达。 5.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒,其特征在于:重组蛋白p54血清的获得方式为:将非洲猪瘟病毒的p54基因插入到原核载体pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导重组蛋白表达。 6.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒化学发光试剂盒,其特征在于:进样区(11)的数量为3个,出样区(14)的数量为1个,检测区(11)中的阳性对照区(131)、阴性对照区(133)和空白对照区(132)的数量分别为1个,反应区(134)的数量至少为2个,阳性对照区(131)和阴性对照区(133)分别使用一个进样区(11),空白对照区(132)和反应区(134)共用进样区(11)和出样区(14)。
所属类别: 发明专利
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