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原文传递一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法

专利名称：	一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法
摘要：	一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法。包括以下步骤：(1)标准样品的配制；(2)待测样品处理；(3)取标准样品和待测样品上超高效液相色谱‑串联三重四级杆质谱法对供试样品进行定性定量测定；(4)使用机器自带的LabSolutions Ver.5.80分析软件极性线性拟合，以浓度为横坐标，待测样品峰面积与内标峰面积比值为纵坐标，内标法制作校准曲线，根据得到的回归方程计算待测样品中杂环胺的含量。本发明的检测方法具有快速准确、精密度好、灵敏度高的优点，可以很好地满足烟熏培根中杂环胺的检测分析工作的需求和发展趋势。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	黑龙江;23
申请人：	东北农业大学
发明人：	孔保华;刘骞;杜洪振;张欢;陈佳新
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-15T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-13T00:00:00+0800
申请号：	CN201910403426.4
公开号：	CN110118833A
代理机构：	哈尔滨龙科专利代理有限公司
代理人：	高媛
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	150000 黑龙江省哈尔滨市香坊区公滨路木材街59号
主权项：	1.一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：所述的方法具体步骤如下：步骤一：内标溶液的配制：将内标4，7，8-TriMeIQx先用甲醇溶解后，再用乙腈稀释配制成标准储备液，使用乙腈继续稀释，即得到内标溶液；步骤二：标准溶液的配制：先将12种杂环胺分别用甲醇溶解，再使用乙腈进行稀释，得到标准溶液；步骤三：混合标准液的配制：吸取步骤二中配制的12种杂环胺的标准溶液及步骤一中配制的内标溶液进行混合定容，使得混合标准液中12种杂环胺浓度均为100μg/L，随后用乙腈-水溶液逐级稀释成0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L及50.0μg/L，其中每种梯度混合标准液中内标溶液浓度均为20μg/L，置于4℃备用；步骤四：待测样品的处理：向待测样品中加入内标溶液和氢氧化钠与甲醇的混合液，均质1min，离心，净化，30℃下氮吹浓缩至体积小于20μL，复溶，涡旋混匀，滤膜过滤后得到待测样品溶液；步骤五：分析检测：取步骤三得到的混合标准液和步骤四得到的待测样品溶液上超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱仪对步骤四得到的待测样品溶液中的杂环胺进行定性定量测定。 2.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤一中，所述的标准储备液的浓度为100μg/mL，所述的内标溶液的浓度为200μg/L。 3.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤二中，所述的标准溶液的浓度均为100μg/mL。 4.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤四中，所述的待测样品、内标溶液、氢氧化钠与甲醇的混合液三者的混合比例为2g：200μL：9.8mL；所述的氢氧化钠与甲醇的混合液中氢氧化钠与甲醇的质量比为7：3。 5.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤四中，所述的离心参数为10750g离心10min。 6.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤四中，所述的净化过程具体为：首先依次使用3mL甲醇、3mL0.1mol/L氢氧化钠溶液活化固相萃取柱，上样10mL，弃去流出液后，然后依次用3mL氢氧化钠-甲醇混合溶液、2mL正己烷淋洗，每次淋洗完后都需要将固相萃取柱内的淋洗溶液抽干，最后用2.0mL乙醇-二氯甲烷溶液洗脱，洗脱流速小于1mL/min；所述的氢氧化钠-甲醇混合溶液中氢氧化钠与甲醇的质量比为1：1；所述的乙醇-二氯甲烷溶液中乙醇与二氯甲烷的质量比为1：9；所述的固相萃取柱为Oasis MCX固相萃取小柱。 7.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤四中，使用1mL乙酸铵缓冲液-乙腈混合溶液复溶。 8.根据权利要求7所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：所述的乙酸铵缓冲液浓度为15mmol/L，乙酸铵缓冲液-乙腈混合溶液中乙酸铵缓冲液与乙腈的体积比为1：1。 9.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤四中，所述的滤膜的孔径为0.22um，有机系。 10.根据权利要求1所述的一种同步检测烟熏肉制品中12种杂环胺的方法，其特征在于：步骤五中，所述的色谱的条件为：色谱柱Shim-pack XR-ODSш，柱温40℃，流速为0.3mL/min-1，单次进样体积为2.0μL，流动相A为10mM乙酸铵，流动相B为乙睛，梯度洗脱程序：0～3.5min，40％A、60％B；3.5～8min，10％A、90％B；8～13min，90％A、10％B；所述的质谱的条件为：离子源ESI+，雾化气流速2.0～5.0L/min，加热气流量8.0～12.0L/min，干燥器流量8.0～12.0L/min，接口温度280～320℃，DL温度230～270℃，加热块温度380～420℃，毛细管电压3.5～4.5kV，离子源温度85～95℃，脱溶剂气温度320～380℃，脱溶剂气流量750～850L/h，扫描模式多反应监测。
所属类别：	发明专利