详情

原文传递高效液相色谱法测定利伐沙班中遗传毒性杂质的方法

专利名称：	高效液相色谱法测定利伐沙班中遗传毒性杂质的方法
摘要：	本发明提供了一种高效液相色谱法测定利伐沙班中遗传毒性杂质的方法，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相采用体积比计为69‑71∶29‑31的水和乙腈，调节所述水的pH值至2.5±0.1；检测波长为245nm～255nm和/或225nm～235nm。本发明提供的高效液相色谱法测定利伐沙班中遗传毒性杂质的方法，能够更好的控制利伐沙班的质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京悦康科创医药科技股份有限公司
发明人：	宋更申;李军立;安百锋;赵红;张婷婷
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-13T00:00:00+0800
申请号：	CN201910455744.5
公开号：	CN110118836A
代理机构：	北京路浩知识产权代理有限公司
代理人：	王文君;陈征
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	北京市大兴区经济技术开发区景园街6号2号楼四层
主权项：	1.一种高效液相色谱法测定利伐沙班中遗传毒性杂质的方法，其特征在于，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相采用体积比计为69-71∶29-31的水和乙腈，调节所述水的pH值至2.5±0.1；检测波长为245nm～255nm和/或225nm～235nm。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相采用体积比计为70∶30的水和乙腈流动相，和/或，用三氟乙酸调节所述水的pH值至2.5。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为Waters T3 C18；优选的，所述色谱柱的规格为：内径4.6，长度250mm，填料粒径5μm。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，供试品溶液的制备方法为：取利伐沙班10mg，置量瓶中，加水适量，超声10min，用水稀释至10ml刻度，搅拌，过滤，取续滤液作为所述供试品溶液。 5.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，对照品溶液的制备方法为：取1-羟基苯并三唑、SM2、SM3及4,5-二氯-噻吩-2-甲酸对照品各适量，加乙腈溶解并用水稀释，制成每1ml中各含0.05-0.25μg优选0.15μg的对照品溶液。 6.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述遗传毒性杂质包括1-羟基苯并三唑、SM2、SM3和4,5-二氯-噻吩-2-甲酸；和/或，所述检测波长为250nm和230nm；优选的，所述250nm用于检测1-羟基苯并三唑、SM3、4,5-二氯-噻吩-2-甲酸，所述230nm用于检测SM2。 7.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，流速为0.8-1.2ml/min，优选为1ml/min；和/或，柱温为25-35℃，优选为30℃；和/或，进样体积为30-50μl，优选为40μl。 8.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，洗脱方式采用等度洗脱。 9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，还包括对系统适用性溶液进行测定，所述系统适用性溶液的制备方法为：取1-羟基苯并三唑、SM2、SM3、4,5-二氯-噻吩-2-甲酸及利伐沙班各适量，加乙腈溶解并用水稀释，制成每1ml中各含0.1-1.5μg优选1μg的系统适用性试验溶液。 10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)制备所述供试品溶液、所述对照品溶液和所述系统适用性溶液：所述供试品溶液的制备方法：取利伐沙班10mg，置量瓶中，加水适量，超声10min，用水稀释至10ml刻度，搅拌，过滤，取续滤液作为所述供试品溶液；所述对照品溶液的制备方法：取1-羟基苯并三唑、SM2、SM3及4,5-二氯-噻吩-2-甲酸对照品各适量，加乙腈溶解并用水稀释，制成每1ml中各含0.15μg的对照品溶液；所述系统适用性溶液的制备方法：取1-羟基苯并三唑、SM2、SM3、4,5-二氯-噻吩-2-甲酸及利伐沙班各适量，加乙腈溶解并用水稀释，制成每1ml中各含1μg的系统适用性试验溶液； 2)采用高效液相色谱对所述供试品溶液、所述对照品溶液和所述系统适用性溶液进行测定；测定条件包含：所述色谱柱采用Waters T3 C18，所述色谱柱的规格为：内径4.6，长度250mm，填料粒径5μm；所述流动相采用体积比计为70∶30的水和乙腈，所述水用三氟乙酸调节pH值至2.5；所述柱温为30℃，所述进样体积为40μl；所述流速为1ml/min；采用等度洗脱；检测波长为250nm、230nm，检测波长250nm用于检测1-羟基苯并三唑、SM3、4,5-二氯-噻吩-2-甲酸，检测波长230nm用于检测SM2。
所属类别：	发明专利