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原文传递一种分离测定LCZ696异构体杂质的方法

专利名称：	一种分离测定LCZ696异构体杂质的方法
摘要：	一种分离测定LCZ696异构体杂质的方法，具有以下步骤：1)取LCZ696或含有LCZ696的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1‑10mg/ml的试样溶液；2)取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释50‑1000倍，得到对照溶液；3)采用多糖衍生物或纤维素衍生物反相涂敷型手性色谱柱，设置流动相的流速为0.4‑0.8ml/min，所述流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为体积浓度是0.0001‑1.0％的缓冲溶液，流动相B为乙腈‑甲醇混合液，乙腈、甲醇的体积比为75‑85:25‑15，100体积份的流动相B中添加有0‑1体积份的磷酸，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱；4)分别向高效液相色谱仪进样等体积的步骤1)试样溶液、步骤2)对照溶液，进样量为5μl‑100μl，利用200nm至280nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中异构体的分离测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	重庆;50
申请人：	重庆三圣实业股份有限公司
发明人：	代广会;谢青山;柳玲;何伟;彭磊;黄雄鸠;唐安凤;晏香兰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910469003.2
公开号：	CN110133150A
代理机构：	重庆飞思明珠专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘念芝
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	400700 重庆市北碚区三圣镇街道
主权项：	1.一种分离测定LCZ696异构体杂质的方法，其特征在于，具有以下步骤， 1)制备试样溶液取LCZ696或含有LCZ696的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1-10mg/ml的试样溶液； 2)制备对照溶液取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释50-1000倍，得到对照溶液； 3)采用多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱或者纤维素衍生物反相涂敷型手性色谱柱，设置流动相的流速为0.4-0.8ml/min，所述流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为体积浓度是0.0001-1.0％的缓冲溶液，流动相B为乙腈-甲醇混合液，乙腈、甲醇的体积比为75-85:25-15，100体积份的流动相B中添加有0-1体积份的磷酸，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟，流动相A的体积百分数为65％～75％，流动相B的体积百分数为35％～25％；0分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性减少至55％～45％，流动相B的体积百分数线性增加至45％～55％；50分钟至50.1分钟，流动相A的体积百分数线性增加至65％～75％，流动相B的体积百分数线性减少至35％～25％；50.1分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为65％～75％，流动相B的体积百分数为35％～25％； 4)分别向高效液相色谱仪进样等体积的步骤1)试样溶液、步骤2)对照溶液，进样量为5μl-100μl，利用200nm至280nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中异构体的分离测定。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)、步骤2)所述稀释剂为甲醇和水的混合物，甲醇与水的体积比为75-95：25-5。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，甲醇与水的体积比为80：20。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)流动相A为体积浓度是0.001-0.2％的缓冲溶液。 5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于，步骤3)所述缓冲溶液为磷酸或磷酸盐溶液或两者的混合物，所述磷酸盐为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二铵或任意混合。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)多糖衍生物为直链淀粉或纤维素衍生物；所述纤维素衍生物为纤维素-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯、纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(4-氯-3-甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟，流动相A的体积百分数为70％，流动相B的体积百分数为30％；0分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性减少至550％，流动相B的体积百分数线性增加至50％；50分钟至50.1分钟，流动相A的体积百分数线性增加至70％，流动相B的体积百分数线性减少至30％；50.1分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为70％，流动相B的体积百分数为30％。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)进样时，进样量为10μl，利用255nm波长检测，色谱柱的柱温为15-40℃。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，色谱柱的柱温为30℃。
所属类别：	发明专利