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原文传递 多种水溶性维生素含量的测定方法
专利名称: 多种水溶性维生素含量的测定方法
摘要: 本发明涉及维生素含量的测定方法,具体涉及一种多种水溶性维生素含量的测定方法。一种多种水溶性维生素含量的测定方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)标准溶液的制备,(2)标准曲线的制备,(3)待测血清样本的制备,(4)待测血清样本检测;将步骤(3)制备的待测血清样本进行液相质谱检测,将检测结果代入步骤(2)所得的标准曲线,然后根据峰面积比得到待测血清样本中5种水溶性维生素的浓度,然后计算得到待测血清样品中5种水溶性维生素的含量。本发明提供一种选择性高、灵敏度高、步骤简单、适用范围光并且能准确定量血清中多种水溶性维生素含量的测定方法。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 山东;37
申请人: 山东博济医药科技有限公司
发明人: 王素香;程相标;李鹏战;吴冠勋;赵卫芳
专利状态: 有效
申请日期: 2019-05-10T00:00:00+0800
发布日期: 2019-08-16T00:00:00+0800
申请号: CN201910387449.0
公开号: CN110133126A
代理机构: 济南泉城专利商标事务所
代理人: 张贵宾
分类号: G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址: 274000 山东省菏泽市高新区万福办事处中华西路2059号启迪之星205室
主权项: 1.一种多种水溶性维生素含量的测定方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)标准溶液的制备: 分别精密量取5种水溶性维生素,加入适量的纯化水,混合均匀,得到5种水溶性维生素的储备液,每种水溶性维生素的储备液浓度均为100μg/mL,然后将储备液逐级稀释得到5种水溶性维生素的标准工作溶液; 用甲醇溶解内标化合物并转移至容量瓶,用甲醇定容至刻度,分别制成5种内标储备液,浓度均为20μg/mL,再用甲醇稀释内标储备液,稀释至浓度均为10ng/mL的内标工作溶液; (2)标准曲线的制备: 取步骤(1)制备的水溶性维生素的标准工作溶液100μL,加入300μL的内标工作溶液中,涡旋混合1min,得到校正标样;将校正标样进行液相质谱分析,以标准工作溶液与内标工作溶液的峰面积比对标准工作溶液的浓度进行线性回归分析,得到标准曲线; (3)待测血清样本的制备: 精密吸取血清样品100μL置于离心管中,再加入300μL内标工作溶液,涡旋混合1min后,放入温度为4℃、离心速度为11000rpm/min的离心机中离心10min,得到上清液; 取上清液100μL,加入100μL纯水,涡旋混合1min后,得到待测血清样本; (4)待测血清样本检测: 将步骤(3)制备的待测血清样本进行液相质谱检测,将检测结果代入步骤(2)所得的标准曲线,然后根据峰面积比得到待测血清样本中5种水溶性维生素的浓度,然后计算得到待测血清样品中5种水溶性维生素的含量。 2.根据权利要求1所述的一种多种水溶性维生素的含量测定方法,其特征在于,所述5种水溶性维生素包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B9、维生素B12。 3.根据权利要求1所述的一种多种水溶性维生素的含量测定方法,其特征在于,所述步骤(1)中5种水溶性维生素标准工作溶液浓度分别为:维生素B1为0.5-25ng/mL,维生素B2为0.5-25ng/mL,维生素B6为0.5-25ng/mL,维生素B9为2-100ng/mL,维生素B12为0.1-5ng/mL。 4.根据权利要求1所述的一种多种水溶性维生素的含量测定方法,其特征在于,所述步骤(1)中的内标化合物为13C4-维生素B1,13C4,15N2-维生素B2,D2-维生素B6,13C5-维生素B9,13C7-维生素B12。
所属类别: 发明专利
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