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原文传递修饰电极、组合产品及其电致化学发光生物传感器与应用

专利名称：	修饰电极、组合产品及其电致化学发光生物传感器与应用
摘要：	本发明涉及修饰电极、组合产品及其电致化学发光生物传感器与应用。所述修饰电极包括电极以及修饰在所述电极上的发光体；所述发光体主要为羧基功能化的聚[(9,9‑二辛基芴‑2,7‑二基)‑共‑(1,4‑苯并‑{2,1’,3}‑噻二唑)]点。所述电致化学发光生物传感器无共反应试剂，能够克服现有的在共反应试剂存在下进行的ECL生物传感器测定中存在的系统稳定性不足、测量存在误差、检测中缺乏再现性等缺陷，构建了无共反应试剂型的双重信号放大电致化学发光策略，同时具有较理想的ECL信号响应值和优异的ECL发光效率，具有优异的高灵敏性、特异选择性和稳定性，为核酸的检测提供一种新方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	重庆;50
申请人：	西南大学
发明人：	陈时洪;李芹;谭兴容
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-14T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910516787.X
公开号：	CN110146566A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	王焕
分类号：	G01N27/30(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	400700 重庆市北碚区天生路2号
主权项：	1.修饰电极，其特征在于，包括电极以及修饰在所述电极上的发光体；所述发光体主要为羧基功能化的聚[(9,9-二辛基芴-2,7-二基)-共-(1,4-苯并-{2,1’,3}-噻二唑)]点；所述电极选自玻碳电极、金电极；优选地，所述电极选自玻碳电极。 2.组合产品，其特征在于，包括：权利要求1所述的修饰电极；DNA S1、DNA S2；DNA发夹H1及DNA发夹H2；所述DNA S1及DNA S2能够互补配对，所述DNA S2上偶联有淬灭剂；所述DNA发夹H1及DNA发夹H2能够在待检测核酸催化下组装形成双足DNA步行器；所述双足DNA步行器的双足部分能够与所述DNA S1互补配对，并在所述配对后的DNA S1上预留出DNA外切酶的酶切位点；所述组合产品不包括共反应试剂。 3.根据权利要求2所述的组合产品，其特征在于，所述组合产品还包括所述DNA外切酶；所述DNA外切酶为核酸外切酶Ⅲ；所述猝灭剂选自黑洞淬灭剂、二茂铁；优选地，所述猝灭剂为黑洞淬灭剂。 4.检测核酸的方法，其特征在于，包括使用权利要求2或3所述的组合产品对待检测核酸进行检测。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括电致化学发光生物传感器的组装方法： a)以所述修饰电极为基质组装DNA S1，引入与所述DNA S1互补配对的DNA S2； b)在所述待检测核酸催化下，DNA发夹H1及H2组装产生双足DNA步行器； c)将所述双足DNA步行器和所述DNA外切酶与步骤a)中所得电极共孵育；其中，步骤a)与b)无先后顺序；优选地，步骤a)中所述DNA S1在交联剂存在下在所述修饰电极上组装；所述交联剂为EDC和NHS。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述修饰电极的制备方法包括：将所述发光体的分散液滴涂于所述电极的表面，干燥成膜，得到所述修饰电极；优选地，所述分散液的分散介质选自二次蒸馏水或超纯水；所述分散液中所述发光体的浓度为0.2mg·mL-1～0.4mg·mL-1。 7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述双足DNA步行器的制备过程包括：将目标物、DNA发夹H1和DNA发夹H2混合得到混合物，并将混合物在25℃～65℃下孵育60～120分钟，优选在37℃下孵育90分钟，获得双足DNA步行器；优选地，所述双足DNA步行器和所述DNA外切酶在所述电极上的孵育时间为1～3小时，优选为2小时。 8.根据权利要求4至7任一项所述的方法，其特征在于，所述核酸为RNA，优选为miRNAs。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述核酸为miRNAs-155；优选地：所述DNA S1的序列如SEQ ID NO:1所示；所述DNA S2的序列如SEQ ID NO:2所示；所述miRNAs-155，其序列如SEQ ID NO:3所示；所述H1的序列如SEQ ID NO:4所示，所述H2的序列如SEQ ID NO:5所示。 10.电致化学发光生物传感器，其由权利要求5、7、8、9中任一项定义的组装方法所组装得到。
所属类别：	发明专利