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原文传递一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂有关物质的分析方法

专利名称：	一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂有关物质的分析方法
摘要：	本发明提供了一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂有关物质的分析方法，该方法可以准确测定化合物T供试品中杂质化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII和化合物IX的含量，且溶剂不干扰杂质检测，方法专属性良好。该检测方法简便﹑快速﹑准确﹑灵敏度高﹑重复性好﹑准确度好，适合工业化生产使用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京正大天晴制药有限公司
发明人：	陈秋;田舟山;吴素素;赵明礼;王喆;舒伟;葛李薇;兰公剑;徐丹;朱春霞
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910449686.5
公开号：	CN110146639A
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	210038 江苏省南京市经济技术开发区惠欧路9号
主权项：	1.一种化合物9-{(R)-2-[((S)-{[(S)-1-(异丙氧基羰基)乙基]氨基}-苯氧基磷酰基)甲氧基]丙基}腺嘌呤富马酸盐(2:1)有关物质的分析方法，其特征在于：所述方法是高效液相色谱法，该方法采用反相色谱柱，流动相A选自磷酸盐缓冲液、四氢呋喃和乙腈中一种或两种以上的组合，流动相B选自磷酸盐缓冲液、四氢呋喃和乙腈中一种或两种以上的组合，按照等度或梯度洗脱。 2.如权利要求1所述的分析方法，其中，所述磷酸盐缓冲溶液为磷酸钠缓冲溶液、磷酸钾、磷酸铵缓冲溶液；优选为磷酸钾缓冲溶液。 3.如权利要求1所述的分析方法，其中，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.01～0.1mol/L；优选为0.01～0.05mol/L；更优选为0.02mol/L。 4.如权利要求1所述的分析方法，其中，所述流动相A为磷酸钾缓冲液-四氢呋喃-乙腈的组合，流动相B为磷酸钾缓冲液-四氢呋喃-乙腈的组合，按照等度或梯度洗脱；优选的，所述流动相A为磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为900～1100:1～20:1～20的混合溶液，流动相B为磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为1～20:2～15:1～10的混合溶液；更优选的，所述流动相A为磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为950～1000:5～10:1～5的混合溶液；流动相B为磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为1～20:2～15:1～10的混合溶液；最优选的，所述流动相A为磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为990：7：3的混合溶液；流动相B为磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为10:7:3的混合溶液。 5.如权利要求1所述的分析方法，其中，所述流动相A和流动相B按照下表进行梯度洗脱 6.如权利要求1所述的分析方法，其中，所述流动相的流速为0.5～2.0ml/min；优选的，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min；更优选的，所述流动相的流速为1.0ml/min。 7.如权利要求1所述的分析方法，其中，所述反相色谱柱采用非极性固定相作为填料；优选的，所述反相色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填料，且其规格为250mm×4.6mm，5μm；更优选的，所述反相色谱柱为Waters XBridge C18，其规格为150mm×4.6mm，3.5μm。 8.如权利要求1所述的分析方法，其中，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用二极管阵列检测器、紫外检测器、示差折光检测器或蒸发光散射检测器；优选的，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器；更优选的，所述分析方法在高效液相色谱仪上进行，采用紫外吸收检测器，且其检测波长为260nm；其中，所述色谱柱的柱温为20～50℃；优选为30～40℃；更优选为35℃；进样器的温度为0～15℃；优选为2～8℃；更优选为2℃、3℃、4℃、5℃、6℃、7℃或8℃；最优选为4℃。 9.一种9-{(R)-2-[((S)-{[(S)-1-(异丙氧基羰基)乙基]氨基}-苯氧基磷酰基)甲氧基]丙基}腺嘌呤富马酸盐(2:1)有关物质的分析方法，其特征在于：所述分析方法是在高效液相色谱仪上进行的；检测器是紫外吸收检测器，检测波长是260nm；色谱柱是反相色谱柱，柱温为35℃；进样器温度为4℃；按照下表梯度洗脱，其中流动相A为0.02mol/L磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为990：7：3的混合溶液；流动相B为0.02mol/L磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为10:7:3的混合溶液；流动相的流速为1.0ml/min；分别注入化合物T供试品溶液、对照溶液和系统适应性溶液；所述系统适用性溶液包含化合物T和选自化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII和化合物IX中的一种或两种以上混合物；通过主成分自身对照法计算化合物T、化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII和/或化合物IX的含量；其中，所述的化合物T，其结构式为：所述化合物I，其结构式为：所述化合物II，其结构式为：所述化合物III，其结构式为：所述化合物IV，其结构式为：所述的化合物V，其结构式为：所述化合物VI，其结构式为：所述的化合物VII，其结构式为：所述杂质化合物VIII，其结构式为：所述化合物IX，其结构式为：其中，化合物III、化合物IV、化合物VI和/或化合物VII的含量计算按照不加校正因子进行计算，化合物I、化合物II、化合物V、化合物VIII和/或化合物IX的含量计算按照加入校正因子进行计算；优选的，化合物I的矫正因子为0.8、化合物II的校正因子为1.2、化合物V的矫正因子为0.8、化合物VIII的影响因子为2.7、化合物IX的校正因子为0.6。 10.一种化合物T有关物质的分析方法，其特征在于： (1)化合物T定位溶液配制：取化合物T对照品，精密称定，用流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述的化合物T，其结构式为： (2)化合物I定位溶液配制：取化合物I，精密称定，用流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述化合物I，其结构式为： (3)化合物II定位溶液配制：取化合物II对照品，精密称定，加流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述化合物II，其结构式为： (4)化合物III定位溶液配制：取化合物III对照品，精密称定，加流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述化合物III，其结构式为： (5)化合物IV定位溶液配制：取杂化合物IV对照品，精密称定，加流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述化合物IV，其结构式为： (6)化合物V定位溶液配制：取化合物V对照品，精密称定，用流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述的化合物V，其结构式为： (7)化合物VI定位溶液配制：取化合物VI对照品，精密称定，加流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述化合物VI，其结构式为： (8)化合物VII定位溶液配制：取化合物VII对照品，精密称定，用流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述的化合物VII，其结构式为： (9)化合物VIII定位溶液配制：取化合物VIII对照品，精密称定，用流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述杂质化合物VIII，其结构式为： (10)化合物IX定位溶液配制：取化合物IX对照品，精密称定，用流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得，其中，所述化合物IX，其结构式为： (11)系统适用性溶液配制：取化合物T、化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII和化合物IX各适量，精密称定，加流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得； (12)供试品溶液配制：取9-{(R)-2-[((S)-{[(S)-1-(异丙氧基羰基)乙基]氨基}-苯氧基磷酰基)甲氧基]丙基}腺嘌呤富马酸盐(2:1)供试品适量，精密称定，加流动相A溶解并稀释，定容，摇匀，即得； (13)对照溶液配制：精密量取供试品溶液适量，加流动相A稀释M倍，作为对照溶液； (14)液相条件：采用Waters XBridge C18，规格为150mm×4.6mm，3.5μm的十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，柱温为35℃；检测器是紫外吸收检测器，检测波长是260nm；进样器温度为4℃；流动相A为0.02mol/L磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为990：7：3的混合溶液；流动相B为0.02mol/L磷酸钾缓冲液：四氢呋喃：乙腈的体积比为10:7:3的混合溶液，流动相流速为1ml/min，按下表梯度洗脱： (15)供试品测定：将化合物T定位溶液、化合物I定位溶液、化合物II定位溶液、化合物III定位溶液、化合物IV定位溶液、化合物V定位溶液、化合物VI定位溶液、化合物VII定位溶液、化合物VIII定位溶液、化合物IX定位溶液、系统适用性溶液﹑供试品溶液和对照溶液适量，分别注入液相色谱仪，记录各溶液的色谱图； (16)含量计算：根据各色谱图，通过加校正因子/或不加校正因子的主成分自身对照法计算样品中各杂质含量：其中，At为供试品溶液色谱图中化合物I、化合物II、化合物III、化合物IV、化合物V、化合物VI、化合物VII、化合物VIII或化合物IX各自的峰面积；A为对照溶液中主峰的峰面积，即化合物T的峰面积；f为校正因子；M为稀释的倍数。
所属类别：	发明专利