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原文传递一种检测猪血浆和肺泡液中甲磺酸达氟沙星的方法

专利名称：	一种检测猪血浆和肺泡液中甲磺酸达氟沙星的方法
摘要：	本发明公开了一种检测猪血浆和肺泡液中甲磺酸达氟沙星的方法，包括如下步骤：(1)采用乙腈提取猪血浆和肺泡液中的目标化合物，离心后取上清；(2)于50℃、氮气吹至干燥，复溶，离心，过滤，得到样品提取物；(3)上样，进行高效液相色谱检测，流动相为乙腈‑0.05％磷酸，A相为乙腈，B相为0.05％磷酸，梯度洗脱。本发明建立了猪血浆和肺泡液中甲磺酸达氟沙星的样品提取和检测方法，具有简单快速、灵敏度高的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	华中农业大学
发明人：	郝海红;陶燕飞;潘源虎;谢书宇;程古月;瞿玮;刘振利;谢长清;房诗薇;黄啸;袁宗辉;徐紫慧;罗讯;黄玲利;王玉莲;彭大鹏;王旭;陈冬梅
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201910557203.3
公开号：	CN110221008A
代理机构：	北京汇信合知识产权代理有限公司
代理人：	戴凤仪
分类号：	G01N30/14(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号
主权项：	1.一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)准备样品提取物：取猪血浆，加入提取剂，涡旋，离心，取上清，沉淀物再加入提取剂进行2次提取，涡旋，离心，取上清，合并两次上清，氮气吹至干燥，加入初始流动相溶解，离心，取上清，过滤，得到猪血浆样品提取物；取猪肺泡液，加入提取剂，涡旋，离心，取上清，沉淀物再加入提取剂进行2次提取，涡旋，离心，取上清，合并两次上清，氮气吹至干燥，加入初始流动相溶解，离心，取上清，过滤，得到猪肺泡液样品提取物； (2)将步骤(1)制备的猪血浆和猪肺泡液样品提取物装入样品瓶，进行高效液相色谱检测。 2.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：步骤(1)中所述提取剂为乙腈。 3.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：所述猪血浆为将新鲜猪血与肝素钠按体积比1000:1混合后，3500r/min离心10min，分离上清，即为所述猪血浆。 4.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：所述猪肺泡液为将采集的新鲜猪肺泡灌洗液离心，转速为800r/min，离心时间为10min，分离上清，即为猪肺泡液。 5.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：所述样品提取物与提取剂的体积比为1：4。 6.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：所述涡旋时间为5min。 7.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：所述离心时间为10min，转速为10000r/min。 8.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：初始流动相为磷酸和乙腈的混合液，体积比磷酸：乙腈＝9:1。 9.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：所述高效液相色谱检测的色谱条件为：色谱柱：Agilent SB-Aq，内直径250×4.6mm，粒径5μm；柱温：25℃；检测波长：283nm；进样量：20μL；流速：0.8mL/min；流动相：乙腈-0.05％磷酸，A相为乙腈，B相为0.05％磷酸。 10.根据权利要求1所述的一种检测猪血浆和猪肺泡中甲磺酸达氟沙星的方法，其特征在于：所述高效液相色谱检测的梯度洗脱条件：0～1min，90％体积分数为0.05％的磷酸，1～15min，90％～45％体积分数为0.05％的磷酸，15.1～20min，90％体积分数为0.05％的磷酸。
所属类别：	发明专利