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原文传递一种基于共振能量转移的电致化学发光适配体传感器的制备方法及应用

专利名称：	一种基于共振能量转移的电致化学发光适配体传感器的制备方法及应用
摘要：	本发明涉及电致化学发光适配体传感器技术领域，特别是涉及一种基于共振能量转移的毒死蜱电致化学发光适配体传感器制备方法，包括毒死蜱电致化学发光适配体传感器的制备步骤、使用该传感器测定毒死蜱的操作方法等；以生物分子辅助合成MoS2/CdS纳米球，尺寸和形貌可控，并作为能量供体；银/碳量子点（Ag/CQDs）的生物相容性好，呈超支状结构，作为能量受体，构建的共振能量转移电致化学发光适配体传感器用于检测农残毒死蜱，背景小，特异性好、灵敏度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	济南大学
发明人：	周长利;衣姜乐;陈培培;刘建辉;夏方诠;田栋
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910409337.0
公开号：	CN110186911A
代理机构：	济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业)
代理人：	李茜
分类号：	G01N21/76(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	250022 山东省济南市市中区南辛庄西路336号
主权项：	1.一种基于共振能量转移的毒死蜱电致化学发光适配体传感器的制备方法及应用，其特征在于，以MoS2/CdS纳米球作为能量供体，银/碳量子点Ag/CQDs作为能量受体，实现对毒死蜱的高灵敏特异性检测。 2.权利要求1所述的基于共振能量转移的传感器制备方法，其特征在于，所述MoS2/CdS纳米球是基于生物分子辅助法合成，呈球形网状结构；所述生物分子是 L-半胱氨酸；所述银/碳量子点Ag/CQDs呈超支状结构，并用来标记毒死蜱适配体。 3.权利要求1-2任一项所述的MoS2/CdS纳米球，其特征在于，其制备方法如下：称取0.2156 g柠檬酸钠·二水和0.0848 g L-半胱氨酸溶解在35.0 mL乙二胺中，搅拌30min，得到澄清溶液; 称取0.0128 g钼酸铵·四水和0.128 g醋酸镉·二水加入到上述溶液中，继续搅拌2h；转移到高压反应釜中，在真空干燥箱中150 °C反应8 h；用无水乙醇离心洗涤两次，再用超纯水离心洗涤三次，离心机转速为8000 rpm，离心时间为5 min，洗涤，得MoS2/CdS纳米球，将其分散在5.0 mL超纯水中，存储待用。 4.权利要求1-2任一项所述的银/碳量子点Ag/CQDs，其特征在于，其制备方法如下：称取0.8 g柠檬酸钠·二水和6.0 g碳酸氢铵溶解于40.0 mL超纯水中，搅拌溶解；转移至高压反应釜中，在180 °C反应4 h；用透析膜透析上述得到的产物，得到粒径均匀的碳量子点CQDs，旋蒸、存储备用；移取7.0 mL的CQDs溶液，称取0.06 g AgNO3溶解于CQDs的溶液中，在室温下搅拌30min；称取20.0 mg硼氢化钠注入到上述溶液中，继续搅拌30 min，离心、以超纯水洗涤，得到Ag/CQDs，分散在5 mL超纯水中备用。 5.权利要求1-2任一项所述的一种基于共振能量转移的毒死蜱电致化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：取8.0 μL 、1 mg/mL Au NPs@MoS2/CdS分散液滴涂到处理好的玻碳电极表面，自然晾干得Au NPs@MoS2/CdS/GCE；将8.0 μL、10-6 mol/L毒死蜱适配体的互补链cDNA滴涂到Au NPs@MoS2/CdS/GCE表面，置于4 °C孵化过夜，用pH 7.4的PBS清洗，得cDNA/Au NPs@MoS2/CdS/GCE；滴涂4.0 μL、10 μmol/L 6-巯基己醇，封闭非特异性结合位点，在37 °C下孵化60min，再用pH 7.4的PBS缓冲液冲洗；将8.0 μL Ag/CQDs-apt滴涂到cDNA/Au NPs@MoS2/CdS/GCE表面，在37 °C下孵化60min，再用pH 7.4的PBS缓冲液冲洗，得Ag/CQDs-apt/cDNA/Au NPs@MoS2/CdS/GCE，置于4 °C存储备用。 6.权利要求5所述 Au NPs@MoS2/CdS分散液，其特征在于，制备方法如下：在剧烈搅拌下将1.2 mL、0.1 mol/L冰的硼氢化钠注入到40.0 mL含有0.25 mmol/L柠檬酸钠·二水和0.25 mmol/L HAuCl4的水溶液中，并老化6 h，得Au NPs溶液；移取6.0 mL Au NPs溶液及260 μL权利要求3所述的MoS2/CdS纳米球溶液，混合搅拌过夜；之后用无水乙醇和超纯水离心洗涤，离心机转速为6000 rpm，离心时间为5 min，得产物Au NPs@MoS2/CdS，产物分散在超纯水中，存储待用。 7.权利要求5所述 Ag/CQDs-apt，其特征在于，制备方法如下：取2.0 mL 权利要求4所述的Ag/CQDs分散液，与50.0 μL、10-7 mol/L毒死蜱适配体apt混合，置于冰箱中孵化过夜，得Ag/CQDs-apt，离心洗涤之后重新分散在3.0 mL超纯水中备用。 8.权利要求1-2、5任一项所述的电致化学发光适配体传感器用于检测毒死蜱。 9.根据权利要求8所述的检测毒死蜱，其特征在于，步骤如下：在Ag/CQDs-apt/cDNA/Au NPs@MoS2/CdS/GCE表面，滴涂不同浓度的毒死蜱溶液，37 °C下孵化60 min，用pH 7.4的PBS缓冲液冲洗；在含有0.1 mol/L K2S2O8、pH 7.4的PBS 缓冲溶液中，以上述孵化了毒死蜱的电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为辅助电极，在-1.6~0.0 V电位区间内进行循环伏安扫描，光电倍增管800 V，记录得到的光强结果。
所属类别：	发明专利