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原文传递一种快速鉴别反复冻融肉类的方法

专利名称：	一种快速鉴别反复冻融肉类的方法
摘要：	本发明提供一种快速鉴别反复冻融肉类的方法。该方法包括待测样品的制备，MALDI‑TOF‑MS测定，数据处理及PCA分析；其中，所述MALDI‑TOF‑MS方法检测的样品m/z区间为400‑3000Da。本发明的方法能够稳定且精确的实现对反复冻融肉类的鉴别，且方法简便易于操作，结果直观。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东省分析测试中心
发明人：	陈相峰;谢含仪;李慧芝;杨敏莉;张峰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201910645403.4
公开号：	CN110220965A
代理机构：	济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：	孙维傲
分类号：	G01N27/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	250014 山东省济南市历下区科院路19号
主权项：	1.一种快速鉴别反复冻融肉类的方法，所述方法包括待测样品的制备，MALDI-TOF-MS测定，数据处理及PCA分析；其中，所述MALDI-TOF-MS方法检测的样品m/z区间为400-3000Da。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品的制备包括对待测样品进行冻融设计，所述冻融设计包括：将待检测肉品于无菌条件下去除筋膜后分组进行冻融，分组情况包括：冻融0次，将肉冷冻不再移出；冻融1次，将肉冷冻后解冻；冻融2次，重复冻融1次的步骤2次，依此类推，获得多组不同冻融次数的冻融肉样。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，取待测肉样和/或冻融肉样搅碎后提取制备样品提取液，其中，所述提取溶剂为氯仿和甲醇的混合溶剂，两者的体积比为2：1。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述待测样品的提取在超声下进行，超声时间为10-50min、优选30min，静置后取下层提取液作为待测样品备用。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品进行MALDI-TOF-MS测定前需进行点样操作，点样操作包括：取待测样品滴加到MALDI靶板上，风干；将基质溶液滴加到风干的待测样品层上，待溶剂挥发基质形成结晶，将MALDI靶板放置到质谱仪中进行MALDI-TOF-MS测定。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述基质溶液为2,5-二羟基苯甲酸溶液与选自丙酮、乙腈和水中的一种或多种组成的混合溶液；优选地，所述2,5-二羟基苯甲酸溶液的浓度为10-200mg/mL，优选为50-100mg/mL，进一步优选为100mg/mL；优选地，所述基质溶液为2,5-二羟基苯甲酸溶液与丙酮组成的混合溶液或者2,5-二羟基苯甲酸溶液与乙腈和水的二元混合液组成的混合溶液；优选地，乙腈和水的二元混合液中，水的体积百分含量为50-70％。 7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，待测样品的滴加量为0.5-2mL，优选为0.5-1mL，进一步为1mL；优选地，基质溶液的滴加量为0.5-2mL，优选为0.5-1mL，进一步为1mL。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述MALDI-TOF-MS测定的质谱条件为：极性：正极；激光波长：355nm；激光能量：80％-100％；采用反射模式；采样率：1.25 GSs-1；加速电位：±20kV，真空压力：3-5×10-7mbar；脉冲离子提取延迟：100ns；检测质量区间：400-3000Da；优选地，所述质谱仪为Bruker rapifleX MALDI Tissuetyper system或宽谱定量飞行时间质谱QuanTOF。 9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述数据处理包括将MALDI-TOF-MS测定获取的质谱图数值化得到对应的质谱图数据，对质谱图数据进行预处理后进行PCA分析，获取PCA分析图。 10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括根据PCA分析图判断待测样品是否为反复冻融肉。
所属类别：	发明专利