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原文传递一种左奥硝唑有关物质的检测方法

专利名称：	一种左奥硝唑有关物质的检测方法
摘要：	本发明提供了一种左奥硝唑有关物质的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱法，通过采用不同检测波长并组合梯度和等度洗脱，从而实现了左奥硝唑与有关物质IMP‑1至IMP‑8的有效分离和检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京卡文迪许生物工程技术有限公司
发明人：	许永翔;景晓宁
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-06T00:00:00+0800
申请号：	CN201910616979.8
公开号：	CN110208434A
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	210033 江苏省南京市栖霞区仙林街道仙林大学城纬地路9号
主权项：	1.一种左奥硝唑原料药有关物质的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱法，并按照如下检测条件和操作进行检测：检测条件1为：色谱柱1：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相1：以甲醇为流动相1A，水为流动相1B；进行梯度洗脱；检测波长1：310nm至320nm；优选地，为318nm；柱温1：25℃-40℃，优选地为，30℃；流速1：1.0 ml/min -1.5 ml/min ，优选地，为1.2ml/min；对照品溶液1的制备：分别取对照品IMP01、对照品IMP02、对照品IMP03、对照品IMP04、对照品IMP06适量，用体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并稀释制成每1ml含对照品IMP020.2µg，含对照品IMP01、对照品IMP03、对照品IMP04、对照品IMP06各2.5µg的对照品溶液1；供试品溶液1的制备：取约含左奥硝唑50mg的左奥硝唑原料药，置20ml量瓶中，加体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并定量稀释制成每1ml约含左奥硝唑2.5mg的溶液，作为供试品溶液1；在检测条件1下，精密量取供试品溶液1及对照品溶液1各40µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。 2.根据权利要求1所述的检测方法，所述检测方法还包括：检测条件2为：色谱柱2：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相2：以甲醇与水的体积比为（15~25）:（75~85）的甲醇水溶液为流动相2，优选地，流动相2A与流动相2B的体积比为22:78；进行等度洗脱；检测波长2：310nm至320nm；优选地，为310nm；柱温2：25℃-40℃，优选地为，30℃；流速2：0.9 ml/min -1.2 ml/min ，优选地，为1.0ml/min；检测条件3为：色谱柱3：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相3：以甲醇为流动相3A，水为流动相3B；进行梯度洗脱；检测波长3：200nm至220nm；优选地，为210nm；柱温3：25℃-40℃，优选地为，30℃；流速3：1.0 ml/min -1.5 ml/min ，优选地，为1.2ml/min；对照品溶液2的制备：取对照品IMP05适量，用体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并稀释制成每1ml含对照品IMP05 0.2µg的对照品溶液2；供试品溶液2的制备：取约含左奥硝唑50mg的左奥硝唑原料药，置20ml量瓶中，加体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并定量稀释制成每1ml约含左奥硝唑2.5mg的供试品溶液2；对照品溶液3的制备：分别取对照品IMP07、对照品IMP08对照品适量，用体积比为20:80的甲醇水溶液并稀释制成每1ml含对照品IMP08 0.2µg的溶液，含对照品IMP07 2.5µg的对照品溶液3；供试品溶液3的制备：取约含左奥硝唑50mg的左奥硝唑原料药，置20ml量瓶中，加体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并定量稀释制成每1ml约含左奥硝唑2.5mg的溶液，作为供试品溶液3；在检测条件2下，精密量取供试品溶液2及对照品溶液2各40µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；和在检测条件3下，精密量取供试品溶液3及对照品溶液3各40µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。 3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其中，所述流动相1的梯度洗脱为： t/min 0 20 50 60 70 71 80 流动相1B体积% 100 80 80 40 40 100 100 或者，所述流动相1的梯度洗脱为： t/min 0 20 50 60 70 流动相1B体积% 100 80 80 40 40 4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其中，所述流动相3的梯度洗脱为： t/min 0 20 50 60 70 71 80 流动相1B体积% 100 80 80 40 40 100 100 或者，所述流动相3的梯度洗脱为： t/min 0 20 50 60 70 流动相1B体积% 100 80 80 40 40 5.根据权利要求1或2所述的检测方法，还可包括：系统适应性溶液1的制备：精密称取左奥硝唑、对照品IMP01、对照品IMP02、对照品IMP03、对照品IMP04、对照品IMP06适量，用体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并稀释制成每1ml约含左奥硝唑2.5mg、约含各对照品2.5µg的系统适应性溶液1。 6.根据权利要求1或2所述的检测方法，还可包括：精密量取1.0ml供试品溶液1至100ml量瓶中，加体积比为20:80的甲醇水溶液定容至刻度，作为对照溶液1。 7.根据权利要求6所述的检测方法，还可包括：在检测条件1下，精密量取系统适用性溶液1，供试品溶液1、对照溶液1及对照品溶液1各40µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。 8.根据权利要求2所述的检测方法，还可包括：系统适应性溶液2的制备：分别取左奥硝唑、对照品IMP05适量，用体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并稀释制成每1ml约含左奥硝唑2.5mg、约含对照品IMP05 2.5µg的系统适应性溶液2。 9.根据权利要求8所述的检测方法，还可包括：在检测条件2下，精密量取系统适应性溶液2、供试品溶液2及对照品溶液2各40µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。 10.根据权利要求2所述的检测方法，还可包括：系统适应性溶液3的制备：分别取左奥硝唑、对照品IMP07、对照品IMP08适量，用体积比为20:80的甲醇水溶液溶解并稀释制成每1ml约含左奥硝唑2.5mg、约含各对照品IMP07和对照品IMP08 2.5µg的系统适应性溶液3。 11.根据权利要求10所述的检测方法，还可包括：在检测条件3下，精密量取系统适应性溶液3、供试品溶液3及对照品溶液3各40µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
所属类别：	发明专利