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原文传递一种芪参益气滴丸中三七多皂苷成分含量测定方法

专利名称：	一种芪参益气滴丸中三七多皂苷成分含量测定方法
摘要：	本发明涉及一种中药成分检测方法，特别涉及一种芪参益气滴丸中三七多皂苷成分含量测定方法。本发明所述的检测方法，包括以下步骤：A对照品溶液制备:取人参皂苷Rg1对照品，配制成对照品溶液；B供试品溶液制备:取芪参益气滴丸，加氨水溶液超声至溶解，过C18柱，用水洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液；C测定：分别吸取步骤A所得对照品溶液及步骤B所得供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图，根据色谱图计算得出芪参益气滴丸中人参皂苷Rg1，三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天士力医药集团股份有限公司
发明人：	蔡雪恬;阚红玉;高展;孙玉侠
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201810205870.0
公开号：	CN110274978A
代理机构：	北京华科联合专利事务所(普通合伙)
代理人：	王为
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	300410 天津市北辰区淮河道与汀江西路交口天之骄园区法务中心知识产权部
主权项：	1.一种芪参益气滴丸中三七多皂苷成分检测方法，其特征在于，包括以下步骤 A对照品溶液制备:取人参皂苷Rg1对照品，配制成对照品溶液； B供试品溶液制备:取芪参益气滴丸，加氨水溶液超声至溶解，过C18柱，用水洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液； C测定：分别吸取步骤A所得对照品溶液及步骤B所得供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图，根据色谱图计算得出芪参益气滴丸中人参皂苷Rg1，三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量；其中，超高效液相色谱的色谱条件为：以十八烷基键合硅胶为填充剂，乙腈为流动相A，水为流动相B，按以下条件进行梯度洗脱，或 2.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤A对照品溶液制备，方法如下：取人参皂苷Rg1、加甲醇制成含人参皂苷Rg1 0.105～0.195mg/ml的对照溶液。 3.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤B供试品溶液制备中，方法如下：取芪参益气滴丸0.3g-0.6g，加3-5％氨水溶液4-6ml超声至溶解，过C18柱，用水40-60ml洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇5-15ml洗脱至容量瓶中，收集甲醇洗脱液。 4.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤C测定中，流速0.38～0.42ml/min，检测波长203nm，柱温24～26℃，进样量为3μl-5μl。 5.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤C测定中使用相对保留时间和相对校正因子分别确定和计算样品中三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量，三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1相对保留时分别为0.8092～0.8944，0.9747～1.077，1.211～1.339。 6.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤如下：步骤C测定中使用相对保留时间和相对校正因子分别确定和计算样品中三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量，其中，三七皂苷R1相对校正因子为1.250±0.011，人参皂苷Re相对校正因子为1.812±0.020，人参皂苷Rb1相对校正因子为1.426±0.023。 7.一种芪参益气滴丸中三七多皂苷成分指纹图谱建立方法，其特征在于，包括以下步骤 A对照品溶液制备，方法如下：取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1适量，精密称定，加甲醇制成混合对照溶液， B供试品溶液制备:取多批次合格的芪参益气滴丸0.3g-0.6g，加氨水溶液超声至溶解，通过C18柱，用纯化水洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇洗脱，收集洗脱液； C测定：分别吸取步骤A所得的对照品溶液及步骤B所得供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图，根据所得多批次芪参益气滴丸合格药物的色谱图经过计算机模型处理，形成统一一致的色谱图，从而得到一种芪参益气滴丸中三七多皂苷成分标准对照指纹图谱，其中，超高效液相色谱的色谱条件为：以十八烷基键合硅胶为填充剂，乙腈为流动相A，水为流动相B，流速0.38～0.42ml/min，检测波长203nm，柱温24～26℃，进样量为3μl-5μl，按以下条件进行梯度洗脱，或 8.根据权利要求7的方法，其特征在于，步骤如下：对照品溶液制备：取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1适量，精密称定，加甲醇制成含三七皂苷R10.028～0.048mg/ml、人参皂苷Rg10.105～0.195mg/ml、人参皂苷Re0.014～0.026mg/ml、人参皂苷Rb1 0.07～0.13mg/ml的混合对照溶液；供试品溶液制备：取多批次合格的芪参益气滴丸0.3g-0.6g，加3-5％氨水溶液4-6ml超声至溶解，过C18柱，用水40-60ml洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇5-15ml洗脱至容量瓶中，收集甲醇洗脱液；测定分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各4μl，注入超高效液相色谱仪，记录25分钟内色谱图，并以人参皂苷Rg1对照品峰面积为参照，根据所得多批次芪参益气滴丸合格药物的色谱图经过计算机模型处理，形成统一一致的色谱图，从而得到一种芪参益气滴丸中三七多皂苷成分标准对照指纹图谱；其中色谱条件以十八烷基键合硅胶为填充剂，乙腈为流动相A，水为流动相B，流速0.4ml/min，检测波长203nm，柱温25℃，按以下条件进行梯度洗脱， 9.一种芪参益气滴丸指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤如下：供试品溶液制备:取芪参益气滴丸0.3g-0.6g，精密称定，加氨水溶液超声至溶解，通过C18小柱，用纯化水50ml洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇10ml洗脱至10ml容量瓶中，定容，摇匀，过滤即得；测定：吸取供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图，和芪参益气滴丸中三七多皂苷成分标准对照指纹图谱对照，符合一致为合格产品；其中色谱条件以十八烷基键合硅胶为填充剂，乙腈为流动相A，水为流动相B，流速0.4ml/min，检测波长203nm，柱温25℃，按以下条件进行梯度洗脱， 10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤如下：供试品溶液制备：取芪参益气滴丸0.5g，精密称定，置于15ml离心管中，加4％氨水溶液5ml，超声至溶解，通过C18小柱，用纯化水50ml洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇10ml洗脱至10ml容量瓶中，定容，摇匀，过0.22μm微孔滤膜即得，测定：吸取供试品溶液4μl，注入超高效液相色谱仪，记录25分钟内色谱图，根据所得色谱图和芪参益气滴丸中三七多皂苷成分标准对照指纹图谱对照，符合一致为合格产品。
所属类别：	发明专利