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原文传递一种活血消瘿片HPLC指纹图谱及其制备方法

专利名称：	一种活血消瘿片HPLC指纹图谱及其制备方法
摘要：	本发明公开了一种活血消瘿片HPLC指纹图谱，制备该指纹图谱的方法包括以下步骤：将供试品溶液、混合对照品溶液、单味药材样品溶液、缺样阴性样品溶液分别上高效液相色谱仪进行检测，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为240‑260nm，所述高效液相色谱仪的固定相为C18键合硅胶色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.05‑0.2％三氟乙酸水溶液，采用梯度洗脱。该图谱中含有15个共有指纹峰，利用该指纹图谱能对活血消瘿片中的8种指标成分和5种中药材成分进行归属定位和含量测定，从而实现了对活血消瘿片化学成分的综合检测，能更加全面地反映和控制中药内在质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	武汉爱民制药股份有限公司
发明人：	叶利春;石召华;肖静霞;梁云;柳畅;胡俊杰;曾晓玲;郑娇娇
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910496435.2
公开号：	CN110243986A
代理机构：	武汉开元知识产权代理有限公司
代理人：	徐绍新
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	436070 湖北省鄂州市葛店经济开发区创业大道10号
主权项：	1.一种活血消瘿片HPLC指纹图谱，所述活血消瘿片由桃仁、莪术、柴胡、猫爪草、王不留行、蜣螂虫、土鳖虫、蜈蚣八味中药材制成，其特征在于：该指纹图谱包含15个共有指纹峰，以7号峰为定位峰，保留时间为1.000，其它14个共有指纹峰的相对保留时间依次为1号峰0.35-0.40、2号峰0.45-0.52、3号峰0.60-0.68、4号峰0.75-0.80、5号峰0.82-0.85、6号峰0.85-0.90、8号峰0.99-1.09、9号峰1.10-1.20、10号峰1.43-1.50、11号峰1.51-1.56、12号峰1.57-1.60、13号峰1.61-1.65、14号峰1.66-1.69、15号峰1.78-1.85；其中，4号峰为刺桐碱的共有指纹峰，6号峰为苦杏仁苷的共有指纹峰，7号峰为王不留行黄酮苷的共有指纹峰，11号峰为柴胡皂苷B2的共有指纹峰，12号峰为柴胡皂苷B1的共有指纹峰，13号峰为双去甲氧基姜黄素的共有指纹峰，14号峰为去甲氧基姜黄素的共有指纹峰，15号峰为吉马酮的共有指纹峰；其中，5、6号峰为桃仁的共有指纹峰，4、7、9号峰为王不留行的共有指纹峰，8、10、14、15号峰为莪术的共有指纹峰，2、3、11、12、13号峰为柴胡的共有指纹峰，1号峰为猫爪草的共有指纹峰。 2.如权利要求1所述的活血消瘿片HPLC指纹图谱，其特征在于：其它14个共有指纹峰的相对保留时间依次为1号峰0.378、2号峰0.498、3号峰0.649、4号峰0.777、5号峰0.843、6号峰0.851、8号峰1.068、9号峰1.177、10号峰1.485、11号峰1.544、12号峰1.581、13号峰1.625、14号峰1.663、15号峰1.820。 3.如权利要求1或2所述活血消瘿片HPLC指纹图谱的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 1)取多批次活血消瘿片，研细后用有机溶剂提取，制得供试品溶液； 2)取刺桐碱、苦杏仁苷、王不留行黄酮苷、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷B1、双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、吉马酮对照品，加入有机溶剂溶解，配制成混合对照品溶液； 3)取王不留行、桃仁、莪术、柴胡、猫爪草、蜣螂、蜈蚣、土鳖虫8味中药材，分别用有机溶剂提取，制得单味药材样品溶液，同时制备缺少其中任何一味药材的阴性样品，将阴性样品用有机溶剂提取，制得缺样阴性样品溶液； 4)将供试品溶液、混合对照品溶液、单味药材样品溶液、缺样阴性样品溶液分别上高效液相色谱仪进行检测，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为240-260nm，所述高效液相色谱仪的固定相为C18键合硅胶色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.05-0.2％三氟乙酸水溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～35℃； 5)分别记录供试品溶液、混合对照品溶液、单味药材样品溶液、缺样阴性样品溶液的色谱图，利用混合对照品溶液的色谱图对供试品溶液色谱图中的指标成分进行归属定位；利用单味药材样品溶液和缺样阴性样品溶液的色谱图对供试品溶液色谱图中的药材进行归属定位，同时利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对供试品溶液色谱图进行处理，即得到活血消瘿片指纹图谱。 4.如权利要求3所述活血消瘿片HPLC指纹图谱的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂为70％的乙醇水溶液。 5.如权利要求3所述活血消瘿片HPLC指纹图谱的制备方法，其特征在于：所述C18键合硅胶色谱柱为HSS T3 C18色谱柱。 6.如权利要求3所述活血消瘿片HPLC指纹图谱的制备方法，其特征在于：所述检测波长为250nm。 7.如权利要求3所述活血消瘿片HPLC指纹图谱的制备方法，其特征在于：所述流动相B为0.1％三氟乙酸水溶液。 8.如权利要求3所述活血消瘿片HPLC指纹图谱的制备方法，其特征在于：所述梯度洗脱程序为：时间/min 流动相A/％流动相B/％ 0～15 0 100 15～31 0→2 100→98 31～50 2→11 98→89 50～55 11 89 55～80 11→24 89→76 80～110 24→54 76→46 110～120 54→90 46→10 120～121 90→0 10→100 121～130 0 100 9.权利要求1或2所述的活血消瘿片HPLC指纹图谱在活血消瘿片质量检测中的应用。 10.一种活血消瘿片质量检测方法，其特征在于包括将活血消瘿片待测样品的HPLC指纹图谱与权利要求1或2所述的活血消瘿片HPLC指纹图谱进行比对的步骤。
所属类别：	发明专利