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原文传递一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用

专利名称：	一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用
摘要：	本发明公开了一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用，包括一组血清蛋白和由该一组血清蛋白标志物组制备的检测试剂盒，所述检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：采集血清样本保存在‑80℃的冰箱中、将采集的血清样本进行稀释，分为三个试管、将四种抗体各滴加1μL至ELISA96孔板中进行包被、通过显色计算OD值、判断抗体是否呈阳性；本发明可以证明CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor‑B蛋白和VRK1蛋白任意一种或一种以上组合可作为尘肺病检测标志物，且具有客观性、特异性和准确性的特点，同时本发明提供的检测试剂盒对于尘肺病的早期筛查具有重大意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	华北理工大学
发明人：	朱莹;张明;袁聚祥;徐洪;姚婧昕;段雨霞;王永斌;杨方
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910581058.2
公开号：	CN110244059A
代理机构：	北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	宋平
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	063000 河北省唐山市曹妃甸区唐山湾生态城渤海大道21号
主权项：	1.一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用，包括一组血清蛋白和由该一组血清蛋白标志物组制备的检测试剂盒，其特征在于，所述一组血清蛋白包括CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白，所述检测试剂盒由能检测CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白中任意一种血清差异蛋白的多克隆抗体、磷酸盐缓冲液和ELISA96孔板组成；所述检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：步骤一：采集一组新鲜的血清样本，并将采集到的血清样本保存在-80℃的冰箱中；步骤二：将采集的血清样本按照血清原液、5倍稀释血清液和10倍稀释血清液分为三个试管；步骤三：将四种能检测CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白中任意一种血清差异蛋白的多克隆抗体各滴加1μL至ELISA96孔板中进行包被；步骤四：按照ELISA方法，将步骤二中三个试管内的血清样本加入ELISA96孔板，并通过显色计算OD值，按照OD值＝\|(样本OD-空白对照OD)/阴性对照OD\|＞2.1为阳性的标准进行尘肺病筛查，其中，CHIA蛋白含量标准临界值为467pg/mL、PTPN2蛋白含量标准临界值为1835pg/mL、Factor-B蛋白含量标准临界值为853pg/mL、VRK1蛋白含量标准临界值为284pg/mL；步骤五：当检测的血清样本中任意一个抗体呈阳性，尘肺病筛查判定为该病例为尘肺病疑似患者；步骤六：当检测的血清样本中四个抗体均呈阳性，尘肺病筛查判定该病例为极高危尘肺病患者。 2.根据权利要求1所述的一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用，其特征在于：所述CHIA蛋白的蛋白序列号为Q9BZP6，所述PTPN2蛋白的蛋白序列号为P17706，所述Factor-B蛋白的蛋白序列号为P00751，所述VRK1蛋白的蛋白序列号为Q99986。 3.根据权利要求1所述的一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用，其特征在于：所述步骤一中采集一组新鲜的CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白的来源还可以为来自于血浆样本。 4.根据权利要求1所述的一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用，其特征在于：所述步骤一中一组新鲜的血清样本采集步骤为： S1：按照临床采血方法抽取患者的血液5mL于离心管中，在4℃环境下静置3h； S2：将离心管在4℃环境下，采用2000rpm～3000rpm的离心转速进行离心分离10min； S3：用移液器吸取上层淡黄色的血清，得到血清样本。 5.根据权利要求1所述的一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用，其特征在于：所述步骤五中尘肺病筛查判定为该病例为尘肺病疑似患者后，还需要定期再做检测复查。 6.根据权利要求1所述的一组血清蛋白在制备检测人尘肺病早期筛查试剂中的应用，其特征在于：所述步骤六中尘肺病筛查判定该病例为极高危尘肺病患者后，该病例患者需要立即进行脱尘治疗，并进行进一步检查。
所属类别：	发明专利