原文传递
纳米金标记与液质联用定量人血清中的转铁蛋白的方法
| 专利名称： | 纳米金标记与液质联用定量人血清中的转铁蛋白的方法 |
| 摘要： | 本发明属于生物检测技术领域，涉及纳米金标记与液相色谱质谱联用技术定量人血清中的转铁蛋白的方法，具体涉及基于纳米金标记通过高效液相色谱(HPLC)和电感耦合等离子质谱(ICP‑MS)联用来定量检测人血清中转铁蛋白的方法。本发明的方法包括如下步骤：(1)纳米金颗粒的制备；(2)纳米金标记人血清蛋白中的转铁蛋白；(3)HPLC‑ICP‑MS测量血清中转铁蛋白。本发明的方法成功的应用于人血清样品中转铁蛋白的检测，回收率在93.0‑99.7％之间。由于HPLC的高效分离和ICP‑MS的超灵敏检测，此方法具有同时测定生物样品中多种低丰度标志物的潜力。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 中国计量科学研究院 |
| 发明人： | 冯流星;韩亚琛;熊金平 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-05-27T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-09-27T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910445050.3 |
| 公开号： | CN110286184A |
| 代理机构： | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 靳玲 |
| 分类号： | G01N30/72(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 100029 北京市朝阳区北三环东路18号 |
| 主权项： | 1.纳米金标记与液质联用定量人血清中的转铁蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)纳米金颗粒的制备； (2)纳米金标记血清中的转铁蛋白； (3)HPLC-ICP-MS测量血清中转铁蛋白。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，将氯金酸溶液加热至沸腾，然后将柠檬酸钠溶液快速加入烧瓶中，继续搅拌加热30-40分钟，溶液颜色由浅黄色变为鲜红色，之后在室温下继续搅拌20-30分钟冷却，得纳米金颗粒。 3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，氯金酸与柠檬酸钠的质量比为1～3.8：1。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将制备的纳米金颗粒离心，弃去上清液，重悬于硼酸缓冲液或磷酸缓冲液中。然后将缓冲液中，加入去除白蛋白的血清蛋白，加入的血清蛋白与离心纯化后的纳米金颗粒在37℃下避光孵育2-3h。 5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的硼酸缓冲液或磷酸缓冲液的pH为6.8～7.8，优选为磷酸缓冲液，pH为6.8。 6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的去除白蛋白的血清蛋白为用ProteoExtractTM白蛋白去除试剂盒除去白蛋白的血清蛋白，去除白蛋白后的人血清样品与AuNP间的加入比例为加入比例为1：10-1：200(V：V)，优选为1：10-1：40。 7.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的纳米金颗粒的离心速率为：8000-10000rpm，离心时间为：20-30min。 8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，HPLC和ICP-MS的参数如下： 9.权利要求1-8何一项所述的方法在定量人血清中的转铁蛋白中的应用。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
