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原文传递一种口蹄疫O、A、AsiaⅠ型抗体多重管式化学发光检测试剂盒

专利名称：	一种口蹄疫O、A、AsiaⅠ型抗体多重管式化学发光检测试剂盒
摘要：	本发明涉及一种口蹄疫O、A、AsiaⅠ型抗体多重管式化学发光检测试剂盒，属于抗体检测技术领域。本发明所述试剂盒包括口蹄疫O型抗体的化学发光反应体系和血清标准品，口蹄疫A型抗体化学发光反应体系和血清标准品，口蹄疫AsiaⅠ型抗体化学发光反应体系和血清标准品，以及浓缩洗涤液，发光底物。本发明所述试剂盒能够同时检测口蹄疫O、A、AsiaⅠ型的抗体，并且实现高通量、自动化、高敏感性、高特异性、高重复性、宽检测限检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	甘肃;62
申请人：	中国农业科学院兰州兽医研究所
发明人：	林密;何继军;蒋韬;包艳芳;马军武;陈夏辉;李峰松;李昕;孙燕燕;杨光
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201910646270.2
公开号：	CN110297091A
代理机构：	北京高沃律师事务所
代理人：	瞿晓晶
分类号：	G01N33/58(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	730046 甘肃省兰州市城关区徐家坪1号
主权项：	1.一种口蹄疫O、A、Asia Ⅰ型抗体多重管式化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括口蹄疫O型抗体的化学发光反应体系和血清标准品，口蹄疫A型抗体化学发光反应体系和血清标准品，口蹄疫Asia Ⅰ型抗体化学发光反应体系和血清标准品，浓缩洗涤液，发光底物；所述口蹄疫O型抗体的化学发光反应体系包括磁性微粒包被的口蹄疫O型捕获抗体溶液，灭活的口蹄疫O型病毒抗原溶液和口蹄疫O型酶标检测抗体溶液；所述口蹄疫A型抗体的化学发光反应体系包括磁性微粒包被的口蹄疫A型捕获抗体溶液，灭活的口蹄疫A型病毒抗原溶液和口蹄疫A型酶标检测抗体溶液；所述口蹄疫Asia Ⅰ型抗体的化学发光反应体系包括磁性微粒包被的口蹄疫Asia Ⅰ型捕获抗体溶液，灭活的口蹄疫Asia Ⅰ型病毒抗原溶液和口蹄疫Asia Ⅰ型酶标检测抗体溶液。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述捕获抗体和酶标检测抗体分别独立的包括多克隆抗体或单克隆抗体。 3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述磁性微粒包括以Fe3O4为核心，表面官能团为羟基、羧基、氨基、环氧基或磺酰基的磁性微粒。 4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，灭活的口蹄疫O/A/Asial型病毒抗原为细胞培养的全病毒抗原。 5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒检测结果以效价形式定量，具体计算方法是：通过以效价为横坐标，发光度(RLU)为纵坐标分别制作O/A/Asia Ⅰ型标准曲线，然后分别代入加入待检血清后体系的RLU值，分别计算出待检血清中口蹄疫O/A/AsiaⅠ型抗体效价。 6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述灭活的口蹄疫O/A/Asial型病毒抗原溶液的制备方法分别包括以下步骤：细胞培养后，灭活、纯化、去脂，用稀释液稀释；所述稀释液为0.1M pH7的PBS缓冲液，所述PBS缓冲液含有质量百分含量为0.1～2％的BSA、0.1～1％的PEG、0.5～5％的蔗糖、0.01～0.5％的Tween-20和0.01～0.5％的ProClin300。 7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述磁性微粒包被的口蹄疫O/A/Asial型捕获抗体溶液和口蹄疫O/A/Asial型酶标检测抗体溶液所用稀释液为0.1M pH7的MOPS缓冲液，所述MOPS缓冲液含有质量百分含量为0.1～2％的BSA、0.01～0.5％的Tween-20、0.01～0.5％的ProClin300、0.01～0.5M的MgCl2、0.01～0.5M的NaCl、0.05～3％的水解乳蛋白和0.1～1％的PEG。 8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述口蹄疫O/A/AsiaⅠ型血清标准品分别分为低效价标准品和高效价标准品，所述低效价标准品的低效价范围是1:8～1:256；所述高效价标准品的高效价范围是：1:512～1:2048，标准血清效价通过病毒中和试验和ELISA共同标定。 9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标检测抗体使用的发光标记物包括辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶；所述酶标检测抗体的标记方法包括高碘酸钠法或戊二醛法；所述发光底物与发光标记物对应。 10.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述浓缩洗涤液为pH7的PBS缓冲液或者0.05M pH8的Tris缓冲液，所述浓缩洗涤液还含有0.1～0.5％的Tween-20。
所属类别：	发明专利