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原文传递蛋白检测膜及制备方法和基于核酸适配体-石墨烯拉曼频移的蛋白检测方法

专利名称：	蛋白检测膜及制备方法和基于核酸适配体-石墨烯拉曼频移的蛋白检测方法
摘要：	本发明属于生物技术领域，涉及一种蛋白检测膜及制备方法和基于核酸适配体‑石墨烯拉曼频移的蛋白检测方法。其中，该检测膜包括：特异性识别该蛋白的核酸适配体和基底，所述基底包括石墨烯薄膜，所述核酸适配体附着在所述石墨烯薄膜的表面。本发明提供的检测膜将单层石墨烯作为拉曼光谱的响应基底，选用与石墨烯声子振动模式相关的拉曼特征G峰作为响应信号，可灵敏地指示单层石墨烯的电子结构和界面性质，避免了传统拉曼检测技术中标志物的繁琐制备过程，简化了检测和操作程序。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所
发明人：	高志贤;李双;韩殿鹏;吴瑾;白家磊;宁保安;彭媛;刘厦
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-29T00:00:00+0800
申请号：	CN201910650633.X
公开号：	CN110389232A
代理机构：	北京思创大成知识产权代理有限公司
代理人：	高爽
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	300050 天津市和平区大理道1号
主权项：	1.一种蛋白检测膜，其特征在于，所述蛋白检测膜包括：特异性识别该蛋白的核酸适配体和基底，所述基底包括石墨烯薄膜，所述核酸适配体附着在所述石墨烯薄膜的表面。 2.根据权利要求1所述的蛋白检测膜，其特征在于，所述核酸适配体具有20～100个核苷酸。 3.根据权利要求1所述的蛋白检测膜，其特征在于，所述蛋白为糖蛋白PSA，所述核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述SEQ ID NO:1为5'-TTTTTAATTAAAGCTCGCCATCAAATAGCTTT-3'。 4.根据权利要求1所述的蛋白检测膜，其特征在于，所述蛋白为凝血酶，所述核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述SEQ ID NO:2为5'-AGTCCGTGGTAGGGCAGGTTGGGGTGACT-3'。 5.根据权利要求1-4任一项所述的蛋白检测膜，其特征在于，所述石墨烯薄膜为单层石墨烯薄膜。 6.根据权利要求1-4任一项所述的蛋白检测膜，其特征在于，所述基底还包括SiO2/Si层，所述石墨烯薄膜位于SiO2/Si层上。 7.权利要求1-6任一项所述的检测膜的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：将含有所述核酸适配体的磷酸盐缓冲溶液滴加在所述基底的表面，孵育至所述基底的表面干燥后，水洗所述表面，干燥处理，即获得所述蛋白检测膜。 8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：将所述基底用磷酸盐缓冲溶液清洗，之后干燥处理。 9.一种基于核酸适配体-石墨烯拉曼频移的蛋白检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： 1)获得权利要求1-6任一项所述的蛋白检测膜； 2)检测所述蛋白检测膜的拉曼光谱，记录所述蛋白检测膜的石墨烯的G峰峰位； 3)向附着所述核酸适配体的蛋白检测膜的表面滴加待测溶液，孵育后制成待测样品； 4)检测所述待测样品的拉曼光谱，记录所述待测样品的石墨烯的G峰峰位； 5)比较步骤2)获得的石墨烯的G峰峰位与步骤4)获得的石墨烯的G峰峰位，根据比较结果判断待测溶液中是否含有与蛋白检测膜相对应的目标蛋白和/或检测所述目标蛋白的含量。 10.根据权利要求9所述的蛋白检测方法，其特征在于，所述与蛋白检测膜相对应的目标蛋白为凝血酶。
所属类别：	发明专利