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原文传递一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法

专利名称：	一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法
摘要：	本发明提供了一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，该方法包括以下步骤：1)利用光子晶体微球为模板制备带有氨基的水凝胶微球；2)在带有氨基的水凝胶微球上修饰醛基与抗体分子；3)利用抗原抗体之间的特异性吸附，将修饰有抗体分子的微球置于待检蛋白溶液中，抓取抗原蛋白质分子，然后对微球做银染处理；4)将上述银染后的微球置于拉曼光谱仪下检测。该方法设计原理巧妙、成本低廉、特异性强适用面广，又能维持蛋白质的水相环境，因而保持蛋白石的活性又能反应蛋白质的指纹信息，解决了蛋白质检测方面特异性差、适用面窄、不能反映蛋白指纹信息以及蛋白易失活的缺点，因此可用于临床检验。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏省肿瘤医院
发明人：	牟忠德;郭昌;郑佳俊;翟振宇
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910623498.X
公开号：	CN110455768A
代理机构：	南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙)
代理人：	沈廉
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	210009江苏省南京市玄武区百子亭42号
主权项：	1.一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：该方法包括以下步骤： 1)利用光子晶体微球为模板制备带有氨基的水凝胶微球； 2)在带有氨基的水凝胶微球上修饰醛基与抗体分子； 3)利用抗原抗体之间的特异性吸附，将修饰有抗体分子的微球置于待检蛋白溶液中，抓取抗原蛋白质分子，然后对微球做银染处理； 4)将上述银染后的微球置于拉曼光谱仪下检测。 2.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：所述的带有氨基的水凝胶微球包括聚丙烯酰胺水凝胶微球、壳聚糖微球、聚多巴胺微球、聚乙烯亚胺微球。 3.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：所述的带有氨基的水凝胶微球具有反蛋白石结构，其直径为150～250μm。 4.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：步骤2)所述的修饰醛基所用的试剂为质量分数为3～5％戊二醛溶液。 5.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：步骤2)所述的在带有氨基的水凝胶微球上修饰醛基与抗体分子中，采用的方法为化学偶联法。 6.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：步骤2)所述的抗体分子包括肌红蛋白抗体、血红蛋白抗体、细胞色素C抗体、甲胎蛋白抗体、癌胚抗原抗体。 7.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：步骤3)所述的将修饰有抗体分子的微球置于待检蛋白溶液中的时长为1～2h，待检蛋白溶液的浓度为0.01～100μg/ml。 8.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：步骤3)所述的对微球做银染处理是指在常温下，将抓取抗原蛋白质分子后的微球浸泡在银溶胶中5min～6h。 9.如权利要求8所述的一种基于表面增强拉曼光谱的蛋白质检测方法，其特征在于：所述的银溶胶中银纳米粒子的直径为20～30nm。
所属类别：	发明专利