详情

原文传递一种测定土壤中多氯联苯的方法

专利名称：	一种测定土壤中多氯联苯的方法
摘要：	本发明属于土壤污染物的检测领域，具体涉及一种基于适配体杂交链式反应的固相微萃取材料用于测定土壤中多氯联苯的方法。该检测方法，包括：(1)高选择性固相微萃取涂层材料的制备；(2)利用顶空固相微萃取技术获取样品中的多氯联苯；(3)采用气相色谱‑质谱联用仪获取数据，并对照已绘制的标准曲线，求得土壤中特定多氯联苯的含量。该方法建立的土壤中的特定多氯联苯的定量分析方法简便，步骤简洁，不仅提高了选择性，而且绿色安全。且该方法制备的高选择性涂层只需改变相应核酸适配体的核苷酸序列，便可用于其他有机污染物的检测，该方法在其它污染物的残留分析中以及食品检测中具有较大的应用潜力。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	宁波大学
发明人：	干宁;曾锦;毕文超
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910613963.1
公开号：	CN110412156A
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	315211 浙江省宁波市江北区风华路818号宁波大学343号信箱
主权项：	1.一种测定土壤中多氯联苯的方法，包含如下步骤： (1)AuNMPs@HCR的制备； (2)标准样品处理：将10-300μL的混标多氯联苯和5-15mL蒸馏水置于顶空瓶中，调pH值至6-8，混匀样品； (3)顶空固相微萃取：将步骤(1)制备得到的AuNMPs@HCR吸附在一个磁子上得到A磁子，将A磁子用细铁丝固定在顶空瓶的瓶盖上并密封进行萃取，萃取温度为0-60℃，萃取时间为10-120min； (4)目标物洗脱：将上述吸附多氯联苯的A磁子取下，置于烧瓶中，加入乙醇并在磁力搅拌下洗脱得到洗脱液，搅拌速率为200-600rmp，洗脱时间为1-60min，乙醇用量为1-5mL； (5)气相色谱-质谱联用：用进样针取上述洗脱液1μL，打入气相色谱-质谱联用仪进样口，启动数据采集仪器采集数据； (6)数据处理：改变所述标准样品处理中的所述混标多氯联苯的加入量，重复上述(2)、(3)、(4)和(5)步骤5次，得到6组上述(5)中的多氯联苯的数据，绘制标准曲线； (7)真实样品处理和测定：将待测泥土样品1-20.0g置于顶空瓶中，加入5-15mL蒸馏水，调pH值至6-8，混匀样品；重复上述步骤(3)、(4)和(5)得到数据，并代入已绘制的标准曲线，计算得到泥土样品的多氯联苯浓度；所述步骤(1)包含步骤(1-1)、(1-2)、(1-3)和(1-4)， (1-1)Fe3O4纳米粒子的制备， (1-2)金纳米粒子的制备， (1-3)金纳米粒子修饰Fe3O4纳米粒子得到AuNMPs， (1-4)AuNMPs@HCR的制备：将AuNMPs置于10-100μL浓度为10-20μM巯基化的引物链溶液中，4℃条件下放置24小时，随后磁性分离产物并用PBS缓冲溶液冲洗数次，再加入到H1-Apt和H2-Apt的混合溶液中，该混合溶液的体积和浓度分别为100μL、10μM，并在20-30℃下放置2h，最后，磁性分离后并用PBS缓冲溶液洗涤数次得产物AuNMPs@HCR，其中，所述引物链的浓度为1-10μM，引物链序列组成为：SH-(CH2)6-AGA GTG ATG GAGATT CAG CTT AGC； H1-Apt序列组成为： H2-Apt序列组成为： 2.权力要求1所述的测定土壤中多氯联苯的方法，所述步骤(1-1)、(1-2)和(1-3)如下， (1-1)Fe3O4纳米粒子的制备：将FeCl3·6H2O和无水醋酸钠加入到乙醇中超声溶解，得到的黄色溶液，转移到反应釜中，密封，180-220℃下反应5-16小时，反应完后冷却至室温并磁性分离，所得的黑色固体用去离子水和乙醇反复超声洗涤两次，并真空干燥后储存待用； (1-2)金纳米粒子的制备：将50-200mL质量浓度为0.01％的HAuCl4溶液加入到圆底烧瓶中，放在磁力搅拌器上加热并搅拌，煮沸后，迅速加入1-5mL质量浓度为1％的柠檬酸钠溶液，并剧烈搅拌，溶液变到橙红色，待溶液颜色不再发生变化后，继续加热10min后停止，冷却至室温，所得产物溶液(AuNPs溶液)置于3-8℃保存待用； (1-3)金纳米粒子修饰Fe3O4纳米粒子得到AuNMPs的制备：将5-20mg的Fe3O4纳米粒子置于离心管中，并加入200-400ml的上述AuNPs溶液，充分摇晃后磁性分离，得到Fe3O4@AuNPs(AuNMPs)。 3.权力要求1所述的测定土壤中多氯联苯的方法，所述步骤(5)中的气相色谱-质谱的条件为：色谱柱：Rxi-5ms，30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度：240℃；程序升温条件：初始温度为110℃，保持2min；以20℃/min的速度升温至230℃，保持2min；再以5℃/min的速度升温至250℃，保持2min；再以20℃/min的速度升温至280℃，保持2min；电离模式：EI；选择离子：PCB72：m/z292、290、362；PCB106：m/z324、326、328。
所属类别：	发明专利