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原文传递人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法

专利名称：	人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法
摘要：	本发明公开了一种人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法，通过固相萃取的前处理结合高效液相色谱—质谱仪的技术，同时检测人体尿液中12种二苯甲酮类物质。本发明方法包括以下步骤：将尿液样品酶解，并加入内标物；使用固相萃取小柱提取、净化样品中的14种二苯甲酮类物质；通过高效液相色谱—质谱仪检测尿液中目标物的含量。本发明步骤简单，操作方便，稳定性好，能够快速得出实验数据；样品预处理成本低，利用实验室常见的耗材即可得出结果。另外，此方法还可以同时对12种二苯甲酮类物质进行检测，检测速度快，自动化程度高，回收率能达到71.26‑115.37％。此方法在一定程度上可以提高产业化水平，适应于推广利用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海大学
发明人：	刘雪;王思齐
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-15T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201910400525.7
公开号：	CN110398542A
代理机构：	上海上大专利事务所(普通合伙)
代理人：	顾勇华
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	200444 上海市宝山区上大路99号
主权项：	1.一种人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法，其特征在于，包括如下步骤： a.样品的预处理：在尿液样本中加入1000kU/mL的β-葡萄糖醛酸酶及内标BPA-d16，使混合液混匀后酶解至少4h，得到尿液预处理液，作为试样备用； b.使用固相萃取柱进行富集净化，过柱的具体流程为：首先将固相萃取柱用至少5mL甲醇活化，然后将在所述步骤a中制备的尿液预处理液以1-3mL/min的流速通过小柱，然后用至少5mL的甲酸质量浓度不低于0.1％的甲酸溶液进行淋洗，流速为1-3mL/min，真空泵抽至完全干燥，再用至少5mL乙酸乙酯进行洗脱至试管中，流速不大于1mL/min；然后采用氮吹近干后用1ml甲醇定容，然后转移到液相色谱瓶中用于检测； c.液相色谱—质谱仪测定样品中目标物的含量：建立目标污染物的标准曲线，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标；采用内标法，在液相色谱—质谱仪上定量检测在所述步骤b中转移到液相色谱瓶中的样品内目标物的浓度，从而实现对人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析。 2.根据权利要求1所述人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法，其特征在于：在所述步骤a中，按照每4.5mL尿液样本加入至少1.0mL的β-葡萄糖醛酸酶和至少0.5mL的浓度不低于100μg/ml的内标BPA-d16的配比比例，使混合液混匀后进行酶解反应。 3.根据权利要求1所述人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法，其特征在于：能够同时检测BP、BP-1、BP-2、BP-3、BP-4、BP-5、BP-6、BP-7、BP-8、BP-9、BP-10、4-OH-BP中12种二苯甲酮类物质中的任意几种。 4.根据权利要求1所述人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法，其特征在于：在所述步骤c中，所述液相色谱—质谱仪的检测条件为：柱温为40℃，进样体积为10μL，流速为0.4mL/min。流动相采用HPLC级甲醇(A)和超纯水(B)；梯度(％A)如下：0min，5％；8min，55％；17min，75％；28min，83％；37.5min，90％。干燥气体流量：8L/min，干燥气体温度：300℃，鞘气体温度：350℃，鞘层气体流量：11L/min，雾化器压力：45psi，喷嘴电压(-)：1500V，喷嘴电压(+)：1500V，毛细管电压(-)：4500。 5.根据权利要求1所述人体尿液中二苯甲酮类物质的检测分析方法，其特征在于，在所述步骤c中，控制人体尿液中二苯甲酮类物质的检测定量限范围在0.02-0.05ng/mL之间。
所属类别：	发明专利