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原文传递一种皮肤角质层中脂质的检测方法及其应用

专利名称：	一种皮肤角质层中脂质的检测方法及其应用
摘要：	本发明属于物质检测领域，公开了一种皮肤角质层中脂质的检测方法，包括以下步骤：采样、标准溶液的配置、构建标准曲线、计算滤液中脂质组分的浓度、计算受试者皮肤角质层中脂质组分的含量。与现有技术相比，本发明本对皮肤的采样属于无创伤的采样，且不使用有毒的氯仿，安全性更高；所述检测方法同时将神经酰胺、胆固醇、角鲨烯及亚油酸、油酸等组分分别高效的检测出来，节约耗材、试剂及时间成本。通过检测结果，推算出受试者皮肤中脂质组分的比例，从而指导化妆品中脂质组分的用量，更有利于受试者皮肤对化妆品中有益组分的吸收，达到更好的化妆效果。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	珠海伊斯佳科技股份有限公司
发明人：	粟雨桑;何海鸥;周立武;王德友
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-03T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910594120.1
公开号：	CN110455938A
代理机构：	广州嘉权专利商标事务所有限公司
代理人：	谭志强
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	519055广东省珠海市金湾区平沙镇德祥路198号厂房一楼
主权项：	1.一种皮肤角质层中脂质的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)采样：取胶带贴于受试者皮肤上，然后取下胶带浸入甲醇中，用超声波破碎仪处理，取上清液，然后过滤，制得滤液，备用； (2)标准溶液的配制：分别配置神经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯、油酸的标准溶液，备用； (3)构建标准曲线：分别将步骤(2)制备得到的标准溶液采用HPLC法测定，得到神经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯和油酸的标准曲线，标准曲线分别建立起神经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯和油酸的出峰面积与神经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯和油酸的浓度之间的函数关系式； (4)计算滤液中脂质组分的浓度：将步骤(1)制得的滤液采用HPLC法测定，得到神经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯或油酸的出峰面积，再根据步骤(3)得到的标准曲线，即可计算得到步骤(1)制得的滤液中神经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯或油酸的浓度； (5)计算受试者皮肤角质层中脂质组分的含量：再根据W＝CV/S计算得到受试者皮肤中经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯或油酸的含量，其中C为神经酰胺、胆固醇、亚油酸、角鲨烯或油酸的出峰面积代入步骤(3)所述标准曲线计算得到的浓度，V为步骤(1)制得的滤液的进样的体积，S为步骤(1)中用胶带贴于受试者皮肤上时粘取的皮肤面积，W为受试者皮肤角质层中脂质组分的含量。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中所述胶带为透明的聚酯薄膜胶带；所述胶带的面积为1.0-2.5cm2。 3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中超声波破碎仪每次破碎2s，每次间隔3s，破碎的总时间为10-30min。 4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)所述过滤的过程采用孔径为0.22-0.45μm的滤膜进行过滤。 5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中各标准溶液的配置如下：神经酰胺标准液配制：称取神经酰胺10mg于50mL容量瓶中，加无水乙醇溶解神经酰胺，混合，加无水乙醇定容至50mL，制得神经酰胺储备液，然后分别吸取神经酰胺储备液12.5uL、25uL、62.5uL、125uL、250uL、500uL、1000uL，分别用无水乙醇定容至1mL，配制得到神经酰胺质量浓度为2.5mg/L、5mg/L、12.5mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L的标准系列；胆固醇的标准溶液的配制：取胆固醇50mg于50mL容量瓶中，加甲醇溶解，混合，然后甲醇定容至50mL，制得胆固醇储备液，然后吸取胆固醇储备液50uL、250uL、500uL、1000uL、2000uL，分别用甲醇定容至10mL，配制得到胆固醇质量浓度为5mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L的标准系列；亚油酸的标准溶液的配制：称取亚油酸50mg于50mL容量瓶中，加甲醇溶解亚油酸，混合，再用甲醇定容至50mL，制得亚油酸储备液，然后吸取亚油酸储备液50uL、250uL、500uL、1000uL、2000uL，分别用甲醇定容至10mL，配制得到亚油酸质量浓度为5mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L的标准系列；角鲨烯的标准溶液的配制：称取角鲨烯50mg于50mL容量瓶中，加甲醇溶解角鲨烯，混合，然后用甲醇定容至50mL，制得角鲨烯储备液，然后吸取角鲨烯储备液50uL、250uL、500uL、1000uL、2000uL，分别用甲醇定容至10mL，配制得到角鲨烯质量浓度为5mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L的标准系列；油酸的标准溶液的配制：称取油酸50mg于50mL容量瓶中，加甲醇溶解油酸，混合，然后用甲醇定容至50mL，制得油酸储备液，然后吸取油酸醇储备液50uL、250uL、500uL、1000uL、2000uL，分别用甲醇定容至10mL，配制得到油酸质量浓度为5mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L的标准系列。 6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中HPLC的过程中采用的色谱柱是ZORBAX SB-C18柱，甲醇-异丙醇作为流动相，检测波长为205nm。 7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中HPLC的过程中甲醇-异丙醇的体积比为甲醇:异丙醇＝60-80:40-20。 8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中HPLC的过程中流动相的流速为0.8-1m/min，柱温为25-30℃。 9.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中HPLC的过程中每次的进样量为8-10μL。 10.一种确定化妆品中脂质成分添加量的方法，其特征在于，根据权利要求1-9中任一项所述的检测方法得知的检测结果，添加化妆品中的脂质成分用量。
所属类别：	发明专利