详情

原文传递一种测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法

专利名称：	一种测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法
摘要：	本发明属于生物制药领域，具体涉及一种测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法。本发明将待测粗品肝素钠溶解后，与盐酸和亚硝酸钠进行反应，再进行高效液相色谱法进行检测。本发明提供的肝素钠中多硫酸软骨素的检测方法的检出限可以达到0.002％，与目前现有技术中的检测方法相比，检测灵敏度高，几乎无基线漂移，此方法可以有效控制肝素钠中的多硫酸软骨素，提高肝素钠产品质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京健友生化制药股份有限公司
发明人：	唐咏群;黄锡伟;柯乐
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910447891.8
公开号：	CN110470750A
代理机构：	南京思拓知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	吕鹏涛
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	210032 江苏省南京市高新区学府路16号
主权项：	1.一种测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，待测粗品肝素钠溶解后，与盐酸和亚硝酸钠进行反应，再采用高效液相色谱法进行检测，其中，高效液相色谱条件包括：采用流动相A和流动相B为混合流动相进行梯度洗脱，所述流动相A为磷酸二氢钠溶液，所述流动相B为高氯酸钠-磷酸二氢钠盐溶液；所述梯度洗脱过程为：在0-40分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持45:55不变；在40-55分钟内，流动相A和流动相B的体积比由45:55匀速渐变至0:100；在55-60分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持0:100不变；在60-61分钟内，流动相A和流动相B的体积比由0:100匀速渐变至45:55；在61-80分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持45:55不变。 2.根据权利要求1所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，盐酸的浓度为0.5～1.5M；优选为1.5M。 3.根据权利要求1或2所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，亚硝酸钠的浓度为200～300mg/mL；优选为250mg/mL。 4.根据权利要求3所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，所述流动相A的制备过程如下：称取磷酸二氢钠0.3～0.5g，溶解于1000mL超纯水中，磷酸调节pH至2.5～3.5。 5.根据权利要求4所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，所述流动相A的制备过程如下：称取磷酸二氢钠0.4g，溶解于1000mL超纯水中，磷酸调节pH至3.0。 6.根据权利要求3所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，所述流动相B的制备过程如下：称取磷酸二氢钠0.3～0.5g和高氯酸钠130～150g，溶解于1000mL超纯水中，磷酸调节pH至2.5～3.5。 7.根据权利要求6所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，所述流动相B的制备过程如下：称取磷酸二氢钠0.4g和高氯酸钠140g，溶解于1000mL超纯水中，磷酸调节pH至2.5～3.5。 8.根据权利要求5、6或7所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，高效液相色谱条件包括：色谱柱为AS11-HC；保护住为AG11-HC。 9.根据权利要求8所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，高效液相色谱条件包括：柱温为35～45℃，优选为40℃；检测波长为200～210nm；优选为202nm。 10.根据权利要求9所述的测定粗品肝素钠中多硫酸软骨素的方法，其特征在于，高效液相色谱条件包括：流速为0.2～0.5mL/min；优选为0.22mL/min；进样体积为100μL。
所属类别：	发明专利