主权项: |
1.一种肝素钠中多硫酸软骨素含量的测定方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)标准溶液的制备: 称取多硫酸软骨素0.1g,加100ml水溶解后制得多硫酸软骨素标准溶液; (2)标准曲线的制备: 取步骤(1)制备的标准工作溶液100μL,加入200μL乙腈,涡旋混合1min,置于4℃沉降10min,取出后用1000rpm高速离心机离心10min,取上清液400μL置洁净离心管内,室温氮气吹干,用水定容至1000μL,定容后的液体过0.22μm尼龙滤膜,过Dionex RP柱,滤液上机分析,得到多硫酸软骨素的标准曲线; (3)待测溶液的制备: 取肝素钠样品0.1g置于离心管中加水溶解,加入200μL乙腈,涡旋混合3min,放置沉淀10min,取出后1000rpm离心10min,得到上清液;取上清液1000uL氮气吹干后,加入200μL50%乙腈水溶液复溶,得到待测肝素钠溶液; (4)待测样本的检测: 将步骤(3)制备的待测肝素钠样本进行液相质谱检测,检测结果代入步骤(2)的标准曲线,算出肝素钠溶液中多硫酸软骨素的含量。 2.根据权利要求1所述的一种肝素钠中多硫酸软骨素含量的测定方法,其特征在于,所述色谱条件为:流动相A:0.04%磷酸二氢钾;流动相B:0.04%磷酸二氢钾/14%高氯酸钠;二元梯度:0min,80%A;60min,10%A;61-75min,80%A;流速:0.22ml/min;柱温:30℃。 |