详情

原文传递用于在液体活检中准确诊断疾病靶向生物标记的方法

专利名称：	用于在液体活检中准确诊断疾病靶向生物标记的方法
摘要：	本发明涉及一种使用双水相系统(ATPS)改进靶向生物标记检测和诊断的方法。在一个实施例中，本发明提供了一种用于改进涉及在液体活组织检查中检测或量化一种或多种生物标记的诊断程序的方法，该方法包括使嵌入有ATPS组分的多孔材料与含有生物标记的液体活组织接触、纯化和浓缩靶向生物标记，以及提供包含靶向生物标记的产品以用于执行诊断程序。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	赵尹图
发明人：	赵尹图
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201880021894.9
公开号：	CN110462400A
代理机构：	北京连和连知识产权代理有限公司
代理人：	杨帆
分类号：	G01N33/48(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	美国加利福尼亚州
主权项：	1.一种用于准确诊断疾病的方法，包括以下步骤： (a)提供包含所述疾病的靶向生物标记的样本溶液； (b)提供嵌入有双水相系统(ATPS)的组分的多孔材料，其中当水溶液行进通过所述多孔材料时所述组分形成两相溶液，从而使得一相溶液比另一相溶液行进得更快； (c)允许所述多孔材料芯吸所述样本溶液，其中所述样本溶液中的所述靶向生物标记分配到较快移动的相溶液中并在所述较快移动的相溶液的前部浓缩； (d)从所述较快移动的相溶液的前部收集所述靶向生物标记，得到含有所述靶向生物标记的最终溶液，所述靶向生物标记的浓度比所述样本溶液中的所述靶向生物标记的浓度高至少50倍；以及 (e)使所述最终溶液经受用于检测或量化所述靶向生物标记的诊断测定；其中诊断所述疾病的准确性得到显着改善。 2.根据权利要求1所述的方法，其中所述多孔材料选自由以下组成的群组：玻璃纤维纸、棉基纸、单层基质纸和聚烯烃泡沫垫。 3.根据权利要求1所述的方法，其中所述ATPS组分选自聚合物、盐和表面活性剂。 4.根据权利要求3所述的方法，其中所述聚合物选自由以下组成的群组：聚亚烷基二醇、聚(氧化烯)聚合物、聚(氧化烯)共聚物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙烯己内酰胺、聚乙烯基甲基醚、烷氧基化表面活性剂、烷氧基化淀粉、烷氧基化纤维素、烷基羟烷基纤维素、有机硅改性聚醚、聚N-异丙基丙烯酰胺、聚乙二醇、聚丙二醇和葡聚糖。 5.根据权利要求3所述的方法，其中所述盐选自由以下组成的群组：Kosmotropic盐，离液盐，具有三甲基铵、三乙基铵、三丙基铵、三丁基铵、四甲基铵、四乙基铵、四丙基铵或四丁基铵的阳离子和磷酸盐、硫酸盐、硝酸盐、氯化物或碳酸氢盐、NaCl、Na3PO4、K3PO4、Na2SO4、柠檬酸钾、(NH4)2SO4、柠檬酸钠、乙酸钠、乙酸铵的阴离子的无机盐，以及它们的任何组合。 6.根据权利要求3所述的方法，其中所述表面活性剂选自由以下组成的群组：非离子表面活性剂、洗涤剂、Triton-X、Igepal CA-630和Nonidet P-40。 7.根据权利要求1所述的方法，其中所述样本溶液包含血液、血浆、血清、尿液、唾液、粪便物和身体排泄物中的一种或多种。 8.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶向生物标记选自由以下组成的群组：核酸、蛋白质、碳水化合物、脂质、金属离子、维生素和代谢物。 9.根据权利要求8所述的方法，其中所述核酸是游离DNA或循环肿瘤DNA。 10.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶向生物标记选自由以下组成的群组：甲胎蛋白(AFP)、癌抗原(CA15-3)、癌抗原(CA125)、前列腺特异性抗原BRCA1、癌胚抗原、c-erb-2、P16、p53、醛糖还原酶、血管生成素、膜联蛋白A1、B细胞活化因子(BAFF)、B细胞淋巴瘤2(BCL2)样2、β人绒毛膜促性腺激素、Cal5-3、钙周边蛋白、钙血管蛋白、组织蛋白酶D、小窝蛋白-1、嗜铬粒蛋白A、α晶体蛋白B链(CRYAB)、内皮抑素、嗜酸细胞活化趋化因子-2、上皮细胞粘附分子(EpCAM)、埃兹蛋白、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、半乳凝素-3、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶调节链(GCLR)、凝溶胶蛋白、葡萄糖-6-磷酸(G6P)、糖蛋白130(gp130)、谷胱甘肽S-转移酶Mu1(GSTM1)、丝氨酸蛋白酶、高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)、胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)、胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)、LGL、潜伏相关肽(LAP)、巨噬细胞刺激蛋白(MSP)、MHC I类多肽相关序列A(MICA)、核苷二磷酸激酶B(NME2)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、骨桥蛋白、骨保护素、胃蛋白酶原、过氧化物酶、磷酸丝氨酸氨基转换酶(PSAT1)、前列腺特异性抗原、受体酪氨酸蛋白激酶erbB-3(ErbB3)、丝氨酸蛋白酶抑制剂B3、血管平滑肌细胞生长因子R2(VSGF R2/KDR)、血管内皮生长因子R3(VEGF R3/Flt-4)、甲状腺球蛋白、具有免疫球蛋白样和EGF样结构域的酪氨酸激酶2(TIE-2)、组织纤溶酶原激活物(tPA)、转化生长因子β(TGF-β1)、肿瘤坏死因子受体1(TNF-R1)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)、乳腺癌易感基因I、乳腺癌易感基因II、激肽释放酶、e-钙粘蛋白、Hox肽和同源盒蛋白转录因子EN2抗体。 11.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶向生物标记浓缩高达100倍。 12.根据权利要求1所述的方法，其中所述疾病是癌症。 13.根据权利要求1所述的方法，其中所述诊断测定选自由以下组成的群组：酶联免疫吸附测定(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)、放射性免疫测定(RIA)、基于蛋白质组的方法、印迹程序、免疫测定法、酶学测定和GC/MS。
所属类别：	发明专利