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原文传递一种基于ZnO@AgNCs信号放大的无标型电致化学发光传感器的制备方法

专利名称：	一种基于ZnO@AgNCs信号放大的无标型电致化学发光传感器的制备方法
摘要：	本发明为一种基于ZnO@AgNCs信号放大的无标型电致化学发光传感器的制备方法，涉及一种基于发光材料ZnO@AgNCs为基底，构建用于检测降钙素原(PCT)的无标型免疫传感器的制备方法，本发明属于新型功能材料与生物传感技术领域。具体是以ZnO纳米块为模板，原位生长AgNCs合成复合材料ZnO@AgNCs作为传感器ECL发光基底，ZnO@AgNCs复合材料结合了ZnO及AgNCs各自的发光性能，当PBS缓冲溶液中存在K2S2O8时，ZnO@AgNCs复合材料能发射出高效稳定的ECL信号，实现了ECL信号的放大，以此构建的无标型电致化学发光免疫传感器灵敏特异检测PCT。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	济南大学
发明人：	曹伟;东雪;李璇;赵冠辉;赵磊;苗俊聪;房靖龙;魏琴
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910793150.5
公开号：	CN110470659A
代理机构：	济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业)
代理人：	赵凤
分类号：	G01N21/76(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	250022 山东省济南市市中区南辛庄西路336号
主权项：	1.一种基于ZnO@AgNCs信号放大的无标型电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将玻碳电极用抛光粉打磨，再使用去离子水清洗，将电极置于5 mmol/L铁氰化钾溶液中，并在-0.2 ~ 0.6 V电位下进行扫描，使峰电位的差值小于110 mV；（2）将8 μL，1 ~ 5 mg/mL ZnO@AgNCs复合物溶液滴加在电极上，室温下干燥；（3）将8 μL，1 ~ 2 μg/mL PCT抗体滴加在电极上，室温下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗体，室温下干燥；（4）将3 μL，质量分数为1 ~ 2% BSA溶液滴加于电极上，用以封闭非特异性结合位点，干燥之后使用PBS洗去多余BSA，室温下干燥；（5）将8 μL，0.0001 ~ 200 ng/mL一系列不同浓度的PCT抗原标准溶液滴加于电极上，室温下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗原，室温下干燥。 2.如权利1所述的一种基于ZnO@AgNCs信号放大的无标型电致化学发光传感器的制备方法，其所述的ZnO@AgNCs材料的制备步骤如下： (1) ZnO的制备在搅拌下将10 ~ 30 mL浓度为1~3 mol/L 的KOH与20 ~ 40 mL乙二醇混合，加入10 ~30 mL 0.4 ~ 0.6 M Zn(NO3)2∙6H2O和100 ~ 300 mg十六烷基三甲基溴化铵，搅拌20 min后放置在高压反应釜中，在120 ˚C条件下反应5 h，溶液在8000转速下离心8分钟，分离出上清液倾倒，再用水和乙醇将沉淀洗涤数次，产物在60 ˚C下真空干燥后，研磨保存在4 ˚C下以备使用； (2) ZnO@AgNCs的合成取100 ~ 300 mg ZnO溶于30 mL 水中，再取40 ~60 mg AgNO3溶于1 mL水中，将两溶液混合并搅拌，加1~2滴NaBH4至变色，过夜搅拌6 h后离心洗涤数次，产物在60 ˚C下真空干燥后，研磨保存在4 ˚C下以备使用。 3.如权利1所述的一种基于ZnO@AgNCs信号放大的无标型电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，用于PCT的检测，检测步骤如下：（1）使用电化学工作站的三电极体系进行测试，Ag/AgCl电极作为参比电极，铂丝电极为对电极，所制备的电致化学发光免疫传感器为工作电极，将电化学工作站和化学发光检测仪连接在一起将光电倍增管的高压设置为800 V，循环伏安扫描电位范围为-1.5 ~ 0 V，扫描速率为0.1 V/s；（2）在10 mL、 pH 6.0 ~ 8.5的含浓度为50 mmol/L ~ 100 mmol/L K2S2O8的PBS缓冲溶液中通过电化学发光方法，检测对不同浓度的PCT标准溶液产生的电化学发光信号强度，绘制工作曲线；（3）将待测PCT样品溶液代替PCT标准溶液进行测定。
所属类别：	发明专利