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原文传递一种水产品中脱氢胆酸的检测方法

专利名称：	一种水产品中脱氢胆酸的检测方法
摘要：	本发明涉及一种水产品中添加剂的检测方法，具体是涉及一种水产品中脱氢胆酸的检测方法，配制标准溶液，乙酸铵缓冲盐溶液浸泡水产品样品，加入β‑葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解过夜，乙酸乙酯提取目标物，氮吹浓缩至干后甲醇定容，以液相色谱‑三重四极杆质谱联用仪检测，采用外标法定量，所得标准曲线的相关系数R2＞0.999，脱氢胆酸在1、2、5、10和50ng/mL浓度范围内具有良好的线性关系，对脱氢胆酸的仪器检测限为0.117μg/kg，本方法具有快速简便，灵敏准确，环保廉价的特点，对水产品中脱氢胆酸残留检测具有实际应用、指导意义，回收率、重复性、灵敏度和检测限均满足水产品出口韩国的检测限要求。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	福建;35
申请人：	厦门泓益检测有限公司
发明人：	邹明宇;付加亮;郭亚圈
专利状态：	有效
申请日期：	2019-10-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-12-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201911057215.6
公开号：	CN110618221A
代理机构：	厦门荔信航知专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	谭琳娜
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	361000 福建省厦门市轻工食品工业区
主权项：	1.一种水产品中脱氢胆酸的检测方法，其特征在于：包括以下步骤， S1、配制标准品：将脱氢胆酸标准品用甲醇溶解配制成1.0mg/mL的标准储备溶液，将所述标准储备溶液用甲醇稀释成浓度为100ng/mL标准工作溶液； S2、标准溶液配制：分别吸取步骤S1所述的标准工作溶液10、20、50、100、500μL于2mL离心管中，甲醇定容到1.0mL，过滤，得到系列标准溶液； S3、样品前处理：水产品样品取可食部分搅碎后，加入乙酸铵缓冲溶液和β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶，混匀，酶解；酶解后放置至室温，加入乙酸乙酯，涡旋提取，离心，移取上层有机相，再在下层水相中加入乙酸乙酯，涡旋提取，离心，合并有机相，氮吹浓缩至干，加入甲醇定容，过滤，得到滤液； S4、检测：将步骤S2的系列标准溶液和步骤S3的滤液分别注入液相色谱-三重四极杆质谱联用仪中进行定量和/或定性分析测试。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中所述过滤为采用平均孔径0.22μm的聚四氟乙烯滤膜过滤。 3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中所述样品前处理的具体步骤为，水产品取可食部分搅碎后，准确称取2g于50mL离心管，加入8mL乙酸铵缓冲溶液，再加入100μLβ-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶，涡旋混匀，于恒温振荡器37℃下水浴振荡16h酶解；酶解后放置至室温，加入10mL乙酸乙酯，涡旋提取，4500r/min离心5min，移取上层有机相，再在下层水相中加入10mL乙酸乙酯，涡旋提取，4500r/min离心5min，合并有机相，氮吹浓缩至干，加入1.0mL甲醇定容，一次性注射器吸取过滤，获得滤液。 4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述乙酸铵缓冲溶液中乙酸铵的浓度为15.4g/L，乙酸铵缓冲溶液的pH为5.2。 5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述过滤为采用平均孔径0.22μm的聚四氟乙烯滤膜过滤。 6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤S4中所述液相色谱-三重四极杆质谱联用仪的测试条件为： 1)液相色谱条件色谱柱：Phenomenex Kinetex C18柱(2.1mm×100mm，2.6μm)；柱温：35℃；流速：0.25mL/min；进样量：5μL；流动相A为超纯水，流动相B为乙腈，流动相A和流动相B按体积比40:60进行等度洗脱，时间为7分钟； 2)质谱条件离子源：电喷雾电离源；离子源温度：325℃；毛细管电压：4000V；鞘气温度：350℃；质谱扫描信息为：定量离子对为401.1/330.9，碰撞能30V，源内碎裂电压140V；定性离子对为401.1/249.0，碰撞能35V，源内碎裂电压140V。
所属类别：	发明专利