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原文传递一种精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法

专利名称：	一种精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法
摘要：	本发明涉及一种精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，采用3‑0‑β‑D‑吡喃半乳糖基‑D‑吡喃葡萄糖标准品制备得到标准品溶液，称取低聚半乳糖原料用水溶解后配制成不同浓度的标准曲线溶液，对上述溶液进行离子色谱检测，并利用得到的3‑0‑β‑D‑吡喃半乳糖基‑D‑吡喃葡萄糖标准品色谱峰来定性低聚半乳糖溶液中的低聚半乳糖二糖色谱峰；称取乳粉样品配制成样品溶液，进行离子色谱检测，采用低聚半乳糖原料溶液中已定性的低聚半乳糖二糖作为定量峰，外标法定量，计算样品溶液中低聚半乳糖的含量。本发明解决了现有方法无法准确定性低聚半乳糖并准确测定乳粉中低聚半乳糖含量的问题，具有检出限低、定量准确的优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	通标标准技术服务(青岛)有限公司
发明人：	刘强;赫秀萍;王渤;徐霞;王玉花
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-12-31T00:00:00+0800
申请号：	CN201910929749.7
公开号：	CN110632201A
代理机构：	青岛中天汇智知识产权代理有限公司
代理人：	刘晓娟
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	266101 山东省青岛市崂山区株洲路143号通标中心
主权项：	1.一种精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：采用3-0-β-D-吡喃半乳糖基-D-吡喃葡萄糖标准品制备得到标准品溶液，称取低聚半乳糖原料用水溶解后配制成不同浓度的标准曲线溶液，对所述标准品溶液和标准曲线溶液进行离子色谱检测，并利用得到的3-0-β-D-吡喃半乳糖基-D-吡喃葡萄糖标准品色谱峰来定性低聚半乳糖溶液中的低聚半乳糖二糖色谱峰；称取乳粉样品并溶解，经提取净化后配制成样品溶液，进行离子色谱检测，采用低聚半乳糖原料溶液中已定性的低聚半乳糖二糖作为定量峰，外标法定量，计算样品溶液中低聚半乳糖的含量。 2.根据权利要求1所述的精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，所述色谱条件如下：流动相包括流动相A、流动相B、流动相C和流动相D；采用梯度洗脱，洗脱时间为55min，梯度洗脱程序为： 0～15.0min，流动相A的体积百分数为50％，流动相B的体积百分数为48％，流动相C的体积百分数为0；流动相D的体积百分数为2％； 15.0～30.0min，流动相A从50％～22％，流动相B为48％，流动相C为0；流动相D从2％～30％； 30.0～35.0min，流动相A为22％，流动相B为48％，流动相C为0；流动相D为30％； 35.0～35.1min，流动相A从22％～0，流动相B从48％～0，流动相C从0～100％；流动相D从30％～0； 35.1～45.0min，流动相A为0，流动相B为0，流动相C为100％；流动相D为0； 45.0～45.1min，流动相A为0，流动相B从0～100％，流动相C从100％～0；流动相D为0； 45.1～50.0min，流动相A为0，流动相B为100％，流动相C为0；流动相D为0； 50.0～50.1min，流动相A从0～50％，流动相B从100％～48％，流动相C为0；流动相D从0～2％； 50.1～55.0min，流动相A为50％，流动相B为48％，流动相C为0；流动相D为2％。 3.根据权利要求2所述的精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，所述流动相A为水；所述流动相B为200mmol/L氢氧化钠溶液；所述流动相C为150mmol/L氢氧化钠溶液与500mmol/L乙酸钠溶液的混合溶液；所述流动相D为100mmol/L乙酸钠溶液。 4.根据权利要求2所述的精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，所述色谱条件还包括色谱柱采用3×150mm规格的离子色谱分离柱Dionex CarboPac PA20进行测定，配合3×30mm规格的离子色谱保护柱Dionex CarboPac PA20使用；流速为0.45mL/min；进样量为20μL；柱温控制在35℃，控制柱压范围为2500psi～3500psi。 5.根据权利要求1所述的精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，所述标准品溶液的配制方法为：精密称取适量3-0-β-D-吡喃半乳糖基-D-吡喃葡萄糖标准品，用水溶解，配制成浓度为100μg/mL的标准品溶液。 6.根据权利要求1所述的精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，所述标准曲线溶液的配制方法为：精密称取低聚半乳糖原料，用水溶解并稀释至刻度，按照纯度折算，配制成浓度为1000μg/mL的标准溶液，用一级水稀释并配制成浓度为25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL的标准曲线溶液。 7.根据权利要求1所述的精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，所述样品溶液的配制方法为：精密称取适量乳粉于容量瓶中，加水溶解后，用乙腈定容至刻度，配制成样品溶液，将配制的样品溶液离心后取上清液，加水稀释10倍，摇匀后经净化柱净化、滤膜过滤。 8.根据权利要求7所述的精确检测乳粉中低聚半乳糖含量的方法，其特征在于，所述净化柱为1.0cc OnGuard RP柱，所述滤膜为0.22μm尼龙滤膜。
所属类别：	发明专利