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原文传递苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法

专利名称：	苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法
摘要：	本发明公开了苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法，指纹图谱建立包括以下步骤：步骤1，苓桂术甘汤供试品溶液的制备；步骤2，对照品溶液的制备；步骤3，分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的苓桂术甘汤指纹图谱仪器导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次的苓桂术甘汤的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰，用平均值计算法生成苓桂术甘汤的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积。本发明提供的苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法具有稳定性好、精密度高、重现性好等优点，可对苓桂术甘汤中有效成分进行准确分析，对全面客观评价苓桂术甘汤的质量具有重要的意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京海昌中药集团有限公司
发明人：	蔡宝昌;陈海超;李伟东;金俊杰;秦昆明;李国维;张金龙;孙戡平
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-03T00:00:00+0800
申请号：	CN201811635810.9
公开号：	CN109709251A
代理机构：	南京经纬专利商标代理有限公司
代理人：	杨海军
分类号：	G01N30/86(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	210061 江苏省南京市高新开发区软件园2号研发楼B座1-3层
主权项：	1.一种苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、苓桂术甘汤供试品溶液的制备精密称取茯苓40g、桂枝30g、白术20g与甘草20g，加水超声，过滤收集药液，旋转蒸发药液至干，然后加入95％乙醇加热回流提取，过滤，取上清液，水浴蒸干后加入甲醇溶解，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液；步骤2、混合对照品溶液的制备：精密称定甘草苷、肉桂酸和反式肉桂醛对照品，加甲醇定容，过0.45μm微孔滤膜，得对照品溶液；步骤3、分别精密吸取按步骤1方法制备得到的供试品溶液和步骤2制备得到的对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4、将步骤3中获得的苓桂术甘汤供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择苓桂术甘汤的色谱图中均存在的的色谱峰作为共有峰；利用平均值计算法生成苓桂术甘汤的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。 2.根据权利要求1所述苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1苓桂术甘汤供试品溶液制备方法为：精密称取苓桂术甘汤的药材茯苓40g、桂枝30g、白术20g与甘草20g，加入1L水超声提取，过滤收集药液，旋转蒸发药液至干，加入4倍量95％乙醇加热回流提取3h，过滤取上清液，水浴蒸干后加入20mL甲醇溶液溶解，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液。 3.根据权利要求1所述苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备方法为：精密称定甘草苷、甘草酸铵和肉桂醛对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成甘草苷0.265mg/mL、肉桂酸0.28mg/mL、反式肉桂醛0.315mg/mL的混合对照品溶液。 4.根据权利要求1至3任一项所述苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3中，液相色谱条件为：色谱柱：GS-120-5-C18-AP，流动相：A相为乙腈-B相为水，二极管阵列检测器，检测波长254nm，柱温：30℃，流速0.6mL/min，进样体积：10μL，梯度洗脱。 5.根据权利要求4所述苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法，其特征在于，梯度洗脱程序如下表： 6.根据权利要求5所述苓桂术甘汤指纹图谱的检测方法，其特征在于，指纹图谱中选择6个共有峰作为苓桂术甘汤指纹图谱的特征峰，以这6个特征峰的峰面积作为质量评价的指标，6个共有峰中对照品甘草苷为2号峰，保留时间为31.132分钟，对照品肉桂酸为5号峰，相对保留时间为46.605分钟，对照品反式肉桂醛为6号峰，相对保留时间为61.179分钟，1号峰保留时间为30.288分钟，3号峰保留时间为33.157分钟，4号峰的保留时间为38.039分钟。
所属类别：	发明专利