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原文传递一种无基质效应的均相免疫检测试剂盒及其分析方法和应用

专利名称：	一种无基质效应的均相免疫检测试剂盒及其分析方法和应用
摘要：	本发明涉及一种无基质效应的均相免疫检测试剂盒，其包括：第一组合物，其包含能够与单线态氧反应生成可检测信号的受体以及与之结合的第一抗体或第一抗体片段，所述第一抗体或第一抗体片段能够与待检样品中被分析物的第一表位特异性结合；第二组合物，其包含供体，所述供体能够在激发状态产生单线态氧；第三组合物，其包含磁体微球，所述磁体微球用于分离待检样品中的基质以及待检样品中未与所述第一抗体或第一抗体片段特异性结合的其他非特异物质；第四组合物，所述第四组合物包含能够与被分析物的第二表位特异性结合的第二抗体或第二抗体片段，或包含能够与被分析物的第三表位特异性结合的已知抗原。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京科美生物技术有限公司
发明人：	李会强;赵炜国
专利状态：	有效
申请日期：	2017-10-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-03T00:00:00+0800
申请号：	CN201711012871.5
公开号：	CN109709317A
代理机构：	北京聿宏知识产权代理有限公司
代理人：	吴大建;桑胜梅
分类号：	G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100094 北京市海淀区永丰基地丰贤中路7号北科现代制造园孵化楼B座二层
主权项：	1.一种无基质效应的均相免疫检测试剂盒，其包括：第一组合物，其包含能够与单线态氧反应生成可检测信号的受体以及与之结合的第一抗体或第一抗体片段，所述第一抗体或第一抗体片段能够与待检样品中被分析物的第一表位特异性结合；第二组合物，其包含供体，所述供体能够在激发状态产生单线态氧；第三组合物，其包含磁体微球，所述磁体微球用于分离待检样品中的基质以及待检样品中未与所述第一抗体或第一抗体片段特异性结合的其他非特异物质。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括第四组合物，所述第四组合物包含能够与被分析物的第二表位特异性结合的第二抗体或第二抗体片段。 3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述磁体微球和所述供体均包被有特异性结合配对成员中的一员，所述第二抗体包被有特异性结合配对成员中的另一员。 4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括第四组合物，所述第四组合物包含能够与被分析物的第三表位特异性结合的已知抗原。 5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述磁体微球和所述供体均包被有特异性结合配对成员中的一员，所述已知抗原表面包被有特异性结合配对成员中的另一员。 6.根据权利要求3或5所述的试剂盒，其特征在于，所述特异性结合配对成员为生物素-链霉亲和素系统。 7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述磁体微球通过生物素标记的牛血清白蛋白和/或生物表标记的球蛋白间接被链霉亲和素包被。 8.根据权利要求1～7中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述磁体微球选的粒径为100nm～1μm，优选为200nm～800nm，更优选为300nm～600nm。 9.一种使用如权利要求1～8中任意一项所述试剂盒检测待检样本中是否存在被分析物的均相免疫检测方法，其包括以下步骤： S1，通过磁场将由磁体微球-被分析物所形成的第一复合物与待检样品中的基质以及未与所述第一抗体或第一抗体片段特异性结合的其他非特异物质相分离； S2，将第一组合物、第二组合物与第一复合物接触以形成第二复合物； S3，利用能量或者活性化合物接触所述第二复合物，激发供体产生单线态氧，所述受体与接收到的单线态氧反应生成可检测的化学发光信号； S4，分析所述化学发光信号，判断待检样品中是否存在被分析物和被分析物的含量或浓度。 10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤S1之前还有步骤S0，其将待测样本、第三组合物和第四组合物接触以生成所述的第一复合物。 11.根据权利要求10所述的方法，其中特征在于，当所述被分析物为待检抗原时，所述第四组合物包括能够与被分析物的第二表位特异性结合的第二抗体或第二抗体片段，所述第一复合物中的磁体微球和被分析物通过第二抗体或第二抗体片段相结合。 12.根据权利要求10所述的方法，其中特征在于，当所述被分析物为待检抗体时，所述第四组合物包含能够与被分析物的第三表位特异性结合的已知抗原，所述第一复合物中的磁体微球和被分析物通过已知抗原相结合。 13.根据权利要求10～12中任意一项所述的方法，其特征在于，包括以下步骤： S0，将待检样本、第三组合物和第四组合物混合，得到包含由磁体微球-被分析物所形成的第一复合物的第一混合物； S1，利用磁场吸附第一复合物，移除所述第一混合物中所含有的基质以及其他非特异物质的液体。 14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，步骤S1中移除的液体体积占第一混合物中液体体积的80％-95％。 15.根据权利要求9～14中任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤S1和所述步骤S2之间没有洗涤步骤。 16.根据权利要求9～15中任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤S2和所述步骤S3之间没有洗涤步骤。 17.根据权利要求9～16中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤S2中，先移除磁场后，再将第一组合物和第二组合物加入到第一复合物中以形成第二复合物。 18.根据权利要求1～17中任意一项所述的方法，其特征在于，所述待检样本中的被分析物选自血清或血浆中的病原体抗体、自身抗体、过敏原特异性抗体和过敏原总抗体中的一种或多种。 19.一种如权利要求9～18中任意一项所述方法中包含的第二复合物，其包括：中心体部分，其选自免疫分子中的任一种；能够与单线态氧反应生成可检测发光信号的受体部分，其通过第一抗体或第一抗体片段与中心体相结合，所述第一抗体或第一抗体片段能够与中心体的第四表位特异性结合；能够在激发状态下产生单线态氧的供体部分，其通过桥体与中心体相结合，所述桥体与中心体上不与所述第四表位重叠的第五表位特异性结合；磁体部分，其通过桥体与中心体结合，所述桥体与中心体上不与所述第四表位重叠的第六表位特异性结合。 20.根据权利要求19所述的第二复合物，其特征在于，所述桥体选自能够与中心体特异性结合的已知抗原、第二抗体或第二抗体片段。 21.根据权利要求19或20所述的第二复合物，其特征在于，所述磁体通过生物素标记的牛血清白蛋白和/或生物表标记的球蛋白间接被链霉亲和素包被，所述桥体包被有生物素。 22.根据权利要求19～21中任意一项所述的第二复合物，其特征在于，所述中心体选自人血清或血浆中的病原抗体、自身抗体或过敏原特异性抗体中的一种。 23.一种如权利要求1～8中任意一项所述试剂盒或权利要求9～18中任意一项所述的方法或权利要求19～22中任意一项所述的第二复合物在临床检测血清或血浆中的抗原或抗体中的应用。
所属类别：	发明专利