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原文传递一种完全均相测定胰岛素的检测试剂盒及其方法

专利名称：	一种完全均相测定胰岛素的检测试剂盒及其方法
摘要：	本发明属于生物技术领域，公开了一种完全均相测定胰岛素的检测试剂盒及其方法。本发明基于双抗体夹心技术，吖啶酯标记抗人胰岛素抗体和辣根过氧化物酶标记抗人胰岛素抗体分别结合在胰岛素分子的抗原决定簇上，形成抗体‑抗原‑抗体的免疫复合物，加入触发剂后，辣根过氧化物酶氧化触发剂产生羟自由基，羟自由基的半衰期非常短，且在抗氧化剂的作用下，能保证羟自由基在抗体‑抗原‑抗体的免疫复合物分子内部传递，吖啶酯在羟自由基的作用下，产生光信号，其光信号与胰岛素含量成正相关。本发明试剂盒能够实现完全均相化学发光检测胰岛素，不需要固定抗体，也不需要洗涤过程，具有稳定性好，检测快速便捷，灵敏度高，特异性强的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州市进德生物科技有限公司
发明人：	林伟荣;李民友;齐宗献;段朝晖;高国全;赵肃清;吴新伟
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201811579131.4
公开号：	CN109725162A
代理机构：	广州三环专利商标代理有限公司
代理人：	宋静娜;郝传鑫
分类号：	G01N33/74(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	510663 广东省广州市黄埔区科学城尖塔山路1号J5栋五楼
主权项：	1.一种完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包括吖啶酯标记抗人胰岛素抗体、辣根过氧化物酶标记抗人胰岛素抗体和抗氧化剂；所述试剂R2包括触发剂。 2.根据权利要求1所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述触发剂为对羟基肉桂酸、过氧化氢、过氧化脲中的至少一种，优选地，所述触发剂为对羟基肉桂酸和过氧化氢。 3.根据权利要求1所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述抗氧化剂为抗坏血酸、尿酸、茶多酚、谷胱甘肽、硫代硫酸钠中的至少一种，优选地，所述抗氧化剂为抗坏血酸和硫代硫酸钠。 4.根据权利要求1～3任一项所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：吖啶酯标记抗人胰岛素抗体 0.01-5mg/L 辣根过氧化物酶标记抗人胰岛素抗体 0.01-5mg/L 抗氧化剂 0.01-1w/v％所述试剂R2包括下述浓度的组分：触发剂 5-250mmol/L。 5.根据权利要求4所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括缓冲液、稳定剂和防腐剂。 6.根据权利要求5所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：所述试剂R2包括下述浓度的组分：触发剂 5-250mmol/L 防腐剂 0.01-0.5w/v％。 7.根据权利要求5或6所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液的pH为6.5-8.5，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液、醋酸缓冲液、HEPES缓冲液中至少一种，优选地，所述缓冲液的pH为7.4，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。 8.根据权利要求5或6所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、甘露醇、乙二胺四乙酸二钠、PEG 20000、吐温-20、EC氧化酶、酶稳定剂、甘油中的至少一种，优选地，所述稳定剂为牛血清白蛋白、PEG 20000、EC氧化酶、吐温-20和甘露醇。 9.根据权利要求5或6所述的完全均相测定胰岛素的检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为叠氮钠、ProClin300、KY-100生物防腐剂中的至少一种。 10.根据权利要求1～9任一项所述完全均相测定胰岛素的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，在待测样本中加入试剂R1，在37℃孵育5～20min后，加入试剂R2，立即检测反应物的发光强度值，计算待测样本中胰岛素的含量，其中，待测样本、试剂R1和试剂R2的体积比为1:5:6。
所属类别：	发明专利