详情

原文传递均相检测方法

专利名称：	均相检测方法
摘要：	一种均相检测方法，该均相检测方法包括如下步骤：提供适配体和酶，所述适配体可特异性识别待测物，将所述适配体连接到所述酶上，得适配体‑酶复合物；配置不同浓度的待测物标准溶液，将所述适配体‑酶复合物和所述酶作用的底物加入到所述待测物标准溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，获取酶促反应信号与待测物含量的方程；将所述适配体‑酶复合物和所述底物加入到含有所述待测物的样品溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，根据所述方程计算所述样品溶液中的待测物含量。该均相检测方法具有灵敏度高、重复性好、抗干扰能力强、检测速度快和成本低的特点，可检测各种生物分子，应用非常广泛。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	深圳琅技生命科技有限公司
发明人：	张建亮
专利状态：	有效
申请日期：	2017-11-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-06T00:00:00+0800
申请号：	CN201780001782.2
公开号：	CN110100180A
代理机构：	深圳中一联合知识产权代理有限公司
代理人：	张全文
分类号：	G01N33/58(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	518000 广东省深圳市宝安区石岩街道办佳华豪苑3A11C
主权项：	1.一种均相检测方法，其特征在于，包括如下步骤：提供适配体和酶，所述适配体可特异性识别待测物，将所述适配体连接到所述酶上，得适配体-酶复合物；配置不同浓度的待测物标准溶液，将所述适配体-酶复合物和所述酶作用的底物加入到所述待测物标准溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，获取酶促反应信号与待测物含量的方程；将所述适配体-酶复合物和所述底物加入到含有所述待测物的样品溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，根据所述方程计算所述样品溶液中的待测物含量。 2.如权利要求1所述的均相检测方法，其特征在于，所述酶为全酶，将所述适配体连接到所述全酶上，得所述适配体-酶复合物。 3.如权利要求1所述的均相检测方法，其特征在于：所述酶包括具有互补活性的酶供体和酶受体，将所述适配体连接到所述酶供体上，得适配体-酶供体复合物；配置不同浓度的待测物标准溶液，将所述适配体-酶供体复合物、所述酶受体和所述酶作用的底物加入到所述待测物标准溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，获取酶促反应信号与待测物含量的方程；将所述适配体-酶供体复合物、所述酶受体和所述底物加入到含有所述待测物的样品溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，根据所述方程计算所述样品溶液中的待测物含量。 4.如权利要求1所述的均相检测方法，其特征在于：所述酶包括具有互补活性的酶供体和酶受体，将所述适配体连接到所述酶受体上，得适配体-酶受体复合物；配置不同浓度的待测物标准溶液，将所述适配体-酶受体复合物、所述酶供体和所述酶作用的底物加入到所述待测物标准溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，获取酶促反应信号与待测物含量的方程；将所述适配体-酶受体复合物、所述酶供体和所述底物加入到含有所述待测物的样品溶液中进行酶促反应，测得酶促反应信号，根据所述方程计算所述样品溶液中的待测物含量。 5.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述适配体包括核酸适配体、多肽适配体和肽核酸适配体中的至少一种。 6.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述适配体为修饰的适配体，所述修饰包括环化修饰、甲基化修饰和磷酸化修饰中的至少一种。 7.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述适配体的分子量＜10kDa；和/或所述待测物的分子量＞10kDa。 8.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述待测物包括蛋白质、脂质体、激素、核酸、病毒、细菌、真菌、细胞和组织中的至少一种。 9.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述酶包括葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、β-半乳糖苷酶、过氧化物酶、荧光素酶、碱性磷酸酶和荧光蛋白中的至少一种；和/或所述酶包括天然酶或人工酶；和/或所述底物为显色底物、发光底物和荧光底物中的任意一种。 10.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述酶连接所述适配体的方式为化学偶联、亲和吸附和基因融合表达中的任意一种。 11.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述酶连接有一种或多种所述适配体；和/或所述酶通过连接肽与所述适配体相连接。 12.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，在进行所述酶促反应的过程中，还加入化学物质，所述化学物质包括表面活性剂、环糊精、牛血清白蛋白、酪蛋白、氨基酸、螯合剂、核苷酸、亲水高分子、还原剂、氧化剂、防腐剂、缓冲盐、多糖、醇和金属离子中的至少一种。 13.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述酶促反应信号为比色信号、发光信号和荧光信号中的任意一种。 14.如权利要求1-4任一项所述的均相检测方法，其特征在于，所述均相检测包括管式检测、板式检测、微流控检测和层析检测中的任意一种。 15.一种均相检测方法，其特征在于，包括如下步骤：提供适配体、可发生荧光共振能量转移的供体荧光基团和受体荧光基团，所述适配体可特异性识别待测物；配置不同浓度的待测物标准溶液，将所述供体荧光基团和所述受体荧光基团均连接所述适配体后，加入到所述待测物标准溶液中，测得所述供体荧光基团的荧光强度，获取荧光强度与待测物含量的方程；将连接有所述适配体的供体荧光基团和连接有所述适配体的受体荧光基团加入到含有所述待测物的样品溶液中，测得所述供体荧光基团的荧光强度，根据所述方程计算所述样品溶液中的待测物含量。
所属类别：	发明专利