专利名称: |
测定酒石酸光学异构体含量的方法 |
摘要: |
本发明提供了测定酒石酸光学异构体含量的方法,该方法将待测酒石酸进行高效液相色谱检测,所述高效液相色谱检测是通过结合紫外检测器的高效液相色谱仪进行的,基于高效液相色谱检测结果,确定所述待测酒石酸中L(+)‑酒石酸和D(‑)‑酒石酸的含量,其中,所述待测酒石酸预先经过衍生化处理,所述衍生化处理后的酒石酸连接有发光基团。该方法可以很好地检测出酒石酸中L(+)‑酒石酸和D(‑)‑酒石酸的含量,且方法灵敏度高,专属性强,准确度高。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
湖北;42 |
申请人: |
湖北生物医药产业技术研究院有限公司 |
发明人: |
杨萍;杨艳;胡慧;谢君怡;蒋玉清;刘哲 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2018-12-29T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-05-10T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201811633596.3 |
公开号: |
CN109738560A |
代理机构: |
北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) |
代理人: |
赵天月 |
分类号: |
G01N30/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
申请人地址: |
430075 湖北省武汉市东湖高新技术开发区高新大道666号集团综合办公大楼 |
主权项: |
1.一种测定酒石酸光学异构体含量的方法,其特征在于, 将待测酒石酸进行高效液相色谱检测,所述高效液相色谱检测是通过结合紫外检测器的高效液相色谱仪进行的, 基于高效液相色谱检测结果,确定所述待测酒石酸中L(+)-酒石酸和D(-)-酒石酸的含量, 其中,所述待测酒石酸预先经过衍生化处理,所述衍生化处理后的酒石酸连接有发光基团。 2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述衍生化处理是通过如下方式进行的: 将待测酒石酸与苯甲酰氯发生缩合反应,以便获得衍生化待测酒石酸; 任选地,所述紫外检测器的检测波长为241-243nm,优选为242nm; 任选地,所述高效液相色谱的色谱柱为硅胶表面共价键合直链淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)的色谱柱。 3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,基于高效液相色谱检测结果,确定L(+)-酒石酸和D(-)-酒石酸分别对应的峰面积,进而分别确定L(+)-酒石酸和D(-)-酒石酸的含量。 4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述高效液相色谱的流动相由正相有机溶剂组成,所述正相有机溶剂为选自正己烷、异丙醇、乙醇、叔丁基甲醚、四氢呋喃、正庚烷、二氯甲烷中的至少两种。 5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述正向有机溶剂为二氯甲烷和正己烷。 6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述二氯甲烷在所述正向有机溶剂中的体积比为42%~48%,所述正己烷在所述正向有机溶剂中的体积比为58%~52%。 7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述高效液相色谱的洗脱方式为等度洗脱。 8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述高效液相色谱法的柱温为28~32℃; 任选地,所述高效液相色谱法的流速为0.9~1.1ml/min。 9.一种测定酒石酸光学异构体含量的方法,其特征在于,包括: 1)将待测酒石酸与苯甲酰氯进行缩合反应,以便获得衍生化待测酒石酸,所述衍生化待测酒石酸含有发光基团,所述发光基团为苯环, 2)将所述衍生化待测酒石酸溶于二氯甲烷,以便获得供试品溶液,所述供试品溶液中所述衍生化待测样品酒石酸的浓度为1mg/mL; 3)将所述供试品溶液利用结合紫外检测器的高效液相色谱仪进行高效液相色谱检测,基于检测结果,获得待测酒石酸中L(+)-酒石酸和D(-)-酒石酸的含量,所述紫外检测器的检测波长为241-243nm,所述高效液相色谱的色谱柱为硅胶表面共价键合直链淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)的色谱柱,流速为0.9-1.1ml/min,柱温为28-32℃,流动相如下所示: 二氯甲烷(%V/V) 正己烷(%V/V) 42~48 58~52 10.根据权利要求1-9任一项所述的方法,其特征在于,进一步包括:获得标准曲线,所述标准曲线的获得是通过如下方式进行的: 1)利用权利要求1-9任一项所述的方法测定不同酒石酸光学异构体标准品的浓度,其中,所述酒石酸光学异构体为L(+)-酒石酸,所述L(+)-酒石酸标准品的浓度为0.3091μg/ml,0.5152μg/ml,0.8242μg/ml,1.0303μg/ml,1.2364μg/ml,1.5455μg/ml,2.0606μg/ml,所述酒石酸光学异构体为D(-)-酒石酸,所述D(-)-酒石酸的浓度为0.2914μg/ml,0.4857μg/ml,0.7770μg/ml,0.9713μg/ml,1.1656μg/ml,1.4570μg/ml,1.9426μg/ml, 2)以所述酒石酸光学异构体峰面积为纵坐标,以酒石酸光学异构体浓度为横坐标绘制标准曲线。 |
所属类别: |
发明专利 |