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一种酪氨酸酶荧光生物传感器及其检测莠去津的方法
| 专利名称： | 一种酪氨酸酶荧光生物传感器及其检测莠去津的方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种酪氨酸酶荧光生物传感器及其检测莠去津的方法，该酪氨酸酶荧光生物传感器由氮掺杂石墨烯量子点、酪氨酸酶和多巴胺组成，其中氮掺杂石墨烯量子点作为荧光探针，多巴胺作为催化底物。本发明采用一种酪氨酸酶荧光生物传感器结合荧光分光光度计对莠去津进行快速、灵敏的定量分析。该方法首次将酪氨酸酶生物传感器与荧光光谱法结合用于检测莠去津。与传统的色谱分析方法对比，所述方法采用成本相对较低、操作相对简便且具有小型化潜力的荧光光谱仪对莠去津进行快速、灵敏的定量检测。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 中国农业大学 |
| 发明人： | 王鹏;王冬伟;周志强;刘东晖 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-01-29T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-05-21T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910086975.3 |
| 公开号： | CN109781685A |
| 代理机构： | 北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 钱扬保;张群峰 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 100081 北京市海淀区圆明园西路2号 |
| 主权项： | 1.一种酪氨酸酶荧光生物传感器，其特征在于，由氮掺杂石墨烯量子点、酪氨酸酶和多巴胺组成，其中氮掺杂石墨烯量子点作为荧光探针，多巴胺作为催化底物。 2.根据权利要求1所述的酪氨酸酶荧光生物传感器，其中，所述氮掺杂石墨烯量子点通过以下步骤制得：柠檬酸和氨水在高压反应釜中加热反应后，冷却至室温加入超纯水稀释，加热除去多余氨，冷却后加入超纯水稀释，再经离心后，取上清液即为氮掺杂石墨烯量子点。 3.一种检测莠去津的方法，包括以下步骤： (1)提供如权利要求1-2任一所述的酪氨酸酶荧光生物传感器； (2)配置一系列浓度的莠去津标准液，分别加入到酪氨酸酶磷酸盐缓冲溶液中，混合静置后，加入氮掺杂石墨烯量子点水溶液与多巴胺水溶液，并用磷酸盐缓冲液稀释； (3)使用荧光光谱仪分别测定步骤(2)所得溶液的荧光强度Fa，经线性拟合后得到标准方程； (4)将待检测样品液加入到酪氨酸酶磷酸盐缓冲溶液中，混合静置后，加入氮掺杂石墨烯量子点水溶液与多巴胺水溶液，并用磷酸盐缓冲液稀释振荡一定时间后，采用荧光光谱仪检测荧光强度，与标准方程比对后得出样品液中莠去津的含量。 4.根据权利要求3所述的方法，其中，步骤(3)中还包括检测不含莠去津的酪氨酸酶磷酸盐缓冲溶液、氮掺杂石墨烯量子点水溶液与多巴胺水溶液三种混合后的荧光强度F0，检测单独的氮掺杂石墨烯量子点水溶液的荧光强度F，对测得的荧光强度数据进行处理，得到莠去津对酪氨酸酶活性抑制率(IE，％)数据，抑制率(IE)的计算方法如下： 以莠去津浓度对数与抑制率之间的对应关系建立标准方程。 5.根据权利要求4所述的方法，荧光光谱仪检测荧光强度的激发波长为355nm，发射波长为435nm。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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