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原文传递使用固定的甘露糖磷酸化酮抗原检测样品中分枝杆菌物质存在的方法

专利名称：	使用固定的甘露糖磷酸化酮抗原检测样品中分枝杆菌物质存在的方法
摘要：	本发明涉及固体基质，其包含固定于所述基质的抗原，该抗原能够结合抗体，该抗体指示人或动物中存在分枝杆菌物质，以及在施用所述包含所述固定的抗原的所述固体基质检测样品中针对分枝杆菌物质的抗体存在的方法。该发明还涉及包括所述固体基质的生物传感器。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	中国香港;81
申请人：	凯仪国际有限公司
发明人：	J·T·卡斯特罗普
专利状态：	有效
申请日期：	2017-06-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201780047054.5
公开号：	CN109791145A
代理机构：	上海专利商标事务所有限公司
代理人：	余颖;陈扬扬
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	中国香港北角英皇道663号泓富产业千禧广场805-6室
主权项：	1.一种固体基质，其包含固定于所述固体基质的抗原，其中所述固定的抗原能够结合指示人或动物中存在分枝杆菌物质的抗体，其中所述抗原是由下式(I)所表示的化合物，其中，Y是1至10之间的整数，X+是阳离子或不存在，并且R是烃基，优选烷基，其中，所述抗原是任选地用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰的，和其对映异构体、非对映异构体及混合物。 2.如权利要求1所述的固体基质，其中，在所述抗原中，Y是3至9的整数，优选4至8，最优选其中Y是5。 3.如权利要求1或2所述的固体基质，其中，在所述抗原中，R是C1-C15烷基。 4.如权利要求3所述的固体基质，其中，在所述抗原中，R是C5烷基或C7烷基，优选其中R是正-C5-烷基或正-C7-烷基，最优选其中R是正-C7-烷基。 5.如权利要求1-4中任一项所述的固体基质，其中，在所述抗原中，Y用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰，和/或其中，在所述抗原中，R用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰。 6.如权利要求1-5中任一项所述的固体基质，其中，所述抗原是β-甘露糖磷酸化分枝杆菌酮，任选地用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰。 7.如权利要求1所述的固体基质，其中，所述抗原是其中X+是阳离子或不存在，R是正-C7H15或正-C5H11，任选地是用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰的，和其对映异构体、非对映异构体及混合物。 8.如权利要求6或7所述的固体基质，其中，所述抗原分离自结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)或是除了分枝杆菌之外的生产宿主微生物或其中所述抗原经化学合成。 9.如权利要求1-8中任一项所述的固体基质，其中，所述基质是表面等离子共振装置、电化学阻抗光谱装置、等温滴定量热装置、生物层干涉亮度装置、光栅装置、光子晶体装置、声学共振概况装置或石英晶体微量天平装置的传感表面。 10.如权利要求1-9中任一项所述的固体基质，其中，所述基质是酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western印迹试验、放射性标记试验、光谱试验、免疫荧光、免疫沉淀试验、免疫细胞化学试验、免疫组织化学试验、安培检测试验、伏安检测试验或电化学阻抗光谱试验中的检测表面。 11.一种检测样品中针对分枝杆菌物质的抗体存在的方法，所述方法包括步骤：提供来自人或动物的样品；和检测所述样品中抗体与固定的抗原的结合，其中所述抗原是权利要求1-8中任一项所限定的抗原和其对映异构体、非对映异构体及混合物，其中所述抗原任选地用一个或多个能够固定于固体基质的官能团修饰。 12.如权利要求11所述的方法，其包括提供来自人或动物的样品；和检测所述样品中的抗体与第一类抗原和与一个或多个其他类型抗原的结合，其中所述第一类抗原是权利要求1-8中任一项所限定的抗原和其对映异构体、非对映异构体及混合物，任选地用一个或多个能够固定于固体基质的官能团修饰；并且所述一个或多个其他类型的抗原包含选自下述的抗原： A)分枝菌酸源性抗原，任选地用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰， B)二酰基糖脂抗原；以下述式(III)表示其中： R2和R3，相同或不同，独立地选自H、SO3H、SO3-或SO3-/M+，其中M+是阳离子；和 R2’和R3’，相同或不同，是酰基，其中，式(III)表示的抗原是任选地用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰的，和其对映异构体、非对映异构体及混合物；和 C)结核基腺苷抗原；以下述式(XIV)表示：其中，在式(I)中，R1是H或具有式(XIII)的基团， R2不存在或是式(XV)的基团，前提是R1和R2中的一个是式(XV)的基团， R3和R4独立地选自氢，OH，羧酸基或酰基，其任意组合，其中所述结核基腺苷抗原是任选地用一个或多个能够固定于固体基质的官能团修饰的，和所述抗原的对映异构体，非对映异构体及其混合物。 13.如权利要求12所述的方法，其中，二酰基糖脂抗原由式VII表示：其中R2’和R3’如权利要求12所述。 14.如权利要求12或13所述的方法，其中，在根据式(III)的二酰基糖脂抗原中，R2’和R3中的一个是由下式(IV)表示的基团其中R4是式CnHn+1的直链饱和烃链，其中n是1至20之间的整数，任选地用一个或多个官能团修饰，并且其中Y是1至10之间的整数，并且其中R5是H或OH，并且R2’和R3’中的另一个是式CnHn+1的直链饱和烃链，其中n是1至20之间的整数，任选地用一个或多个官能团修饰。 15.如权利要求12所述的方法，其中，所述二酰基糖脂抗原是根据存在于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)中的二酰化磺基糖脂(Ac2SGL)，任选地用一个或多个官能团修饰，优选其中所述Ac2SGL是2-棕榈酰基-3-羟基结核烯酰-2'-硫酸盐-α-α'-D-海藻糖或2-硬脂酰基-3-羟基结核烯酰-2'-硫酸盐-α-α'-D-海藻糖，任选地用一个或多个官能团修饰。 16.如权利要求12-15中任一项所述的方法，其中，在所述结核基腺苷抗原的式(XIV)中，R4是OH，优选地其中R4和R3是OH。 17.如权利要求12-16中任一项所述的方法，其中，所述结核基腺苷抗原由式(XVI)或(XVII)化合物或包括(XVI)或(XVII)化合物或其组合的式(XIV)结核基腺苷抗原的组合表示任选地用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰。 18.如权利要求12-17中任一项所述的方法，其中，所述结核基腺苷抗原选自：1-结核基腺苷，1-结核基-2'-脱氧腺苷，1-结核基-O-乙酰基腺苷或其组合，任选地用一个或多个能够固定于所述固体基质的官能团修饰。 19.如权利要求12-18中任一项所述的方法，其包括检测所述样品中抗体与权利要求1-8中任一项所述的甘露糖磷酸化酮抗原的结合，并且包括检测所述样品中的抗体与所述二酰基糖脂抗原的结合。 20.如权利要求12-18中任一项所述的方法，其包括检测所述样品中抗体与权利要求1-8中任一项所述的甘露糖磷酸化酮抗原的结合，并且包括检测所述样品中的抗体与所述结核基腺苷抗原的结合。 21.如权利要求12-18中任一项所述的方法，其包括检测所述样品中抗体与权利要求1-8中任一项所述的甘露糖磷酸化酮抗原的结合，并且包括检测所述样品中的抗体与所述二酰基糖脂抗原的结合，并且包括检测所述样品中的抗体与所述结核基腺苷抗原的结合。 22.如权利要求12-18中任一项所述的方法，其包括检测所述样品中抗体与权利要求1-8中任一项所述的甘露糖磷酸化酮抗原的结合，并且包括检测所述样品中的抗体与所述二酰基糖脂抗原的结合，并且包括检测所述样品中的抗体与所述结核基腺苷抗原的结合，并且包括检测所述样品中的抗体与所述分枝菌酸源性抗原的结合。 23.如权利要求12-22中任一项所述的方法，其中，所述抗原固定于一个或多个固体基质。 24.如权利要求12-23中任一项所述的方法，其中，所述样品源自其中细菌载量为10.000结核分枝杆菌/ml唾液或更多的人。 25.如权利要求12-24中任一项所述的方法，其中，检测所述抗体与所述固定的抗原的结合涉及测量基质上物质和/或质量的变化，折射率的变化，熵的变化，焓的变化，粘度变化，温度变化或颜色变化。 26.如权利要求12-25中任一项所述的方法，其中，检测抗体与所述固定的抗原的结合是实时进行的。 27.如权利要求26所述的方法，其中，所述方法包括步骤： i)提供来自人或动物的样品； ii)获得所述样品的至少2个分量； iii)将第一个所述分量暴露于携带所述固定的抗原的固体基质； iv)将第二个所述分量暴露于未携带所述固定的抗原的固体基质； v)将步骤iii)中暴露的所述样品分量暴露于携带所述固定的抗原的固体测试基质，并将步骤iv)中暴露的所述样品分量暴露于携带所述固定的抗原的固体对照基质； vi)实时检测步骤v)抗体与所述固定的抗原的结合；和 vii)比较所述测试基质和对照基质之间结合的程度或范围，任何观察到的与测试基质结合较低是所述样品中存在针对所述固定的抗原的抗体的指征，其指示样品来源的人或动物中的结核病。 28.如权利要求26-27所述的方法，其中，使用表面等离子体共振或电化学阻抗光谱，等温滴定量热法，生物层干涉亮度法，光学光栅，光子晶体，声共振概况，石英晶体微量天平进行检测。 29.如权利要求12-25中任一项所述的方法，其中，检测抗体与所述固定的抗原的结合通过终点试验的方式进行。 30.如权利要求29所述的方法，其中，所述方法包括步骤： i)提供来自人或动物的样品； ii)获得所述样品的至少2个分量； iii)将第一个所述分量暴露于携带所述固定的抗原的固体基质； iv)将第二个所述分量暴露于不携带所述固定的抗原的固体基质；或将第二个所述分量中的至少部分储存直到步骤v)，跳过将第二个所述分量暴露于不携带所述固定的抗原的固体基质的步骤； v)将步骤iii)中暴露的所述样品分量的至少部分暴露于携带所述固定的抗原的固体测试基质，并将步骤iv)中暴露或储存的所述样品分量的至少部分暴露于携带所述固定的抗原的固体对照基质； vi)在终点试验中检测步骤v)抗体与所述固定的抗原的结合；和 vii)比较所述测试基质和对照基质之间结合的程度或范围，任何观察到的与测试基质结合较低是所述样品中针对固定的抗原的抗体存在的指征，其指示样品来源的人或动物中的结核病。 31.如权利要求29或30所述的方法，其中终点试验选自：酶联免疫吸附测定(ELISA)，Western印迹，放射性标记试验，光谱试验，免疫荧光，免疫沉淀，免疫细胞化学，免疫组织化学，电化学阻抗光谱。 32.一种生物传感器，其包含如权利要求1-8所述的固定于基质上的甘露糖磷酸化酮抗原。 33.一种生物传感器，其还包含选自下述的一个或多个固定于一个或多个固体基质上的其他抗原：如权利要求12-17中任一项中所限定的分枝菌酸源性抗原，结核基腺苷抗原，二酰基糖脂抗原。 34.如权利要求1-10中任一项所述的固体基质，其还包含选自下述的一个或多个固定于所述固体基质的其他抗原：如权利要求12-17中任一项中所限定的分枝菌酸源性抗原，结核基腺苷抗原，二酰基糖脂抗原。 35.如权利要求1-10中任一项所述的固体基质，其还包含固定于所述固体基质上的所述结核基腺苷抗原。 36.如权利要求1-10中任一项所述的固体基质，其还包含固定于所述固体基质的所述二酰基糖脂抗原。 37.如权利要求1-10中任一项所述的固体基质，其还包含固定于所述固体基质的所述二酰基糖脂抗原和所述二酰基糖脂抗原。
所属类别：	发明专利