原文传递
水稻清蛋白的提取方法及电泳检测方法
| 专利名称： | 水稻清蛋白的提取方法及电泳检测方法 |
| 摘要： | 本发明提供水稻清蛋白的提取方法及电泳检测方法。稻米经自然风干后，研磨成大米粉，向大米粉中按固液比1g：1mL加入水，搅拌至均匀，浸提1h后离心，取上清液，即为水稻清蛋白提取液。利用本发明提供的水稻清蛋白提取方法，提取的清蛋白更加充分，提高了清蛋白的提取率，且得到的电泳图谱更加清晰。本发明首次将水稻清蛋白电泳技术应用于稻米食味品质评价中，从蛋白质组分结构方面对稻米食味品质进行评价，更加科学。本发明的水稻清蛋白提取方法，适合于不同来源的水稻品种的鉴定，对指导水稻品质育种等具有重要意义。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 黑龙江;23 |
| 申请人： | 黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所 |
| 发明人： | 兰静;张瑞英;贾雯靖;关海涛;孙向东;赵琳;金海涛;王冰 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-01-25T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-05-21T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910071937.0 |
| 公开号： | CN109781825A |
| 代理机构： | 北京路浩知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 王文君;黄爽 |
| 分类号： | G01N27/447(2006.01);G;G01;G01N;G01N27 |
| 申请人地址： | 150086 黑龙江省哈尔滨市学府路368号创新大厦9楼 |
| 主权项： | 1.水稻清蛋白的提取方法，其特征在于，稻米经自然风干后，研磨成大米粉，向大米粉中按固液比1g：1mL加入水，搅拌至均匀，浸提1h后离心，取上清液，即为水稻清蛋白提取液。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，浸提后于15000r/min离心5min。 3.水稻清蛋白的电泳检测方法，其特征在于，将权利要求1或2获得的水稻清蛋白提取液与蛋白提取液混合，静置一段时间后，离心，取上清液进行SDS-PAGE电泳检测； 其中，所述蛋白提取液为：0.125mol/L Tris-HCl pH6.8，4％SDS，20％甘油，4mol/L脲素，5％β-巯基乙醇。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)取100μL水稻清蛋白提取液于离心管内，加入100μL蛋白提取液，振荡混匀，4℃静置30min；然后10000r/min离心5min，取上清进行SDS-PAGE电泳； 2)电泳结束，取出凝胶，于三氯乙酸溶液中固定； 3)染色与脱色：将固定后的凝胶转移至考马斯亮蓝R-250溶液中，摇床染色，然后脱色。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤1)进行SDS-PAGE电泳所配制的凝胶为：15％的分离胶和4％的浓缩胶；在分离胶中，电压为100V，至浓缩胶时，电压降至80V，电泳总时长2.5h。 6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤2)将凝胶于10％三氯乙酸溶液中固定2h。 7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤3)中摇床转速70r/min，染色2h。 8.根据权利要求4-7任一项所述的方法，其特征在于，步骤1)SDS-PAGE电泳的进样量为10μL/孔。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
