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原文传递快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法及应用

专利名称：	快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法及应用
摘要：	本发明公开了快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法及应用，该方法包括：(a)校正集样本的收集；(b)利用考马斯亮蓝法检测校正集样本中蛋白质的浓度；(c)校正集样本拉曼光谱的测定；(d)校正模型的建立；(e)待测样本的检测。本发明提供的基于拉曼光谱快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，操作简单、快速，与传统的蛋白质测定方法(化学显色法)相比，无需配制随行标曲，测定时间短；同时无需使用各项化学试剂与溶剂，具有环境友好性。实施例中丹参提取液的拉曼特征光谱与其中蛋白质浓度之间均存在较好的相关性，测量误差小于10％。本方法通过实时监测质量指标控制中药注射剂中间体的质量，进而保证中药注射剂的安全性与有效性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	贵州;52
申请人：	贵州拜特制药有限公司
发明人：	瞿海斌;潘坚扬;赵芳;薛捷;李白玲;李辉
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201910229302.9
公开号：	CN109799224A
代理机构：	北京联创佳为专利事务所(普通合伙)
代理人：	张梅
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	550014 贵州省贵阳市白云区麦架镇新材料产业园贵州拜特制药有限公司
主权项：	1.快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：通过测定待测中药提取液的蛋白质浓度的拉曼光谱数据，利用构建的校正模型计算得到其中蛋白质的浓度。 2.根据权利要求1所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述方法是通过收集中药提取液校正样本，测定校正样本的拉曼光谱数据，并测定校正样本中蛋白质的浓度，根据建校正样本中蛋白质的浓度和与其对应的拉曼光谱数据建立校正模型，将待测中药提取液的拉曼光谱数据输入构建的校正模型中，即可计算得到其中蛋白质的浓度。 3.根据权利要求2所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述方法是通过收集中药提取液校正样本，采用拉曼光谱技术测定校正样本的拉曼光谱数据，并采用考马斯亮蓝法测定校正样本中蛋白质的作为参照值，采用偏最小二乘法或主成分回归法，分别建立校正样本中拉曼光谱数据与蛋白质浓度之间关系的校正模型，将待测中药提取液的拉曼光谱数据输入构建的校正模型中，即可计算得到其中蛋白质的浓度。 4.根据权利要求3所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述校正样本的拉曼光谱数据是通过拉曼光谱技术进行测定，将校正样本放入10mm光程的石英比色皿中，并置于拉曼光谱仪配套的比色皿架上，进行光谱扫描，获取校正样本拉曼光谱数据，其中拉曼光谱仪激光波长785nm，拉曼位移范围173.7-3200.8cm-1，分辨率4.5cm-1，激光强度50％，积分时间10000ms。 5.根据权利要求1-4任一项所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述待测中药提取液的拉曼光谱数据是通过拉曼光谱技术进行测定，将中药提取液放入10mm光程的石英比色皿中，并置于拉曼光谱仪配套的比色皿架上，进行光谱扫描，获取中药提取液的拉曼光谱数据，每个中药提取液的拉曼光谱需扣除暗电流，扫描3次，取平均光谱数据；其中拉曼光谱仪激光波长785nm，拉曼位移范围173.7-3200.8cm-1，分辨率4.5cm-1，激光强度50％，积分时间10000ms。 6.根据权利要求1-3任一项所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述校正模型是应用化学计量学技术，使用多变量数据处理软件建立中药提取液中蛋白质浓度的多元校正回归模型，所述多变量数据分析法为主成分回归法或偏最小二乘法，采用留一法交叉进行内部验证确定最佳主成分数，所述校正模型的决定系数≥0.95。 7.根据权利要求1-3任一项所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述建立校正模型还包括校正模型的验证，所述验证为：取未知提取液，测定其拉曼特征光谱数据，将其输入校正模型中，计算样本中蛋白质的浓度，与该样本按照考马斯亮蓝法测定的蛋白质浓度比较，要求测量误差小于10％。 8.根据权利要求1-3任一项所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤： (a)收集中药提取液校正样本； (b)校正样本蛋白质浓度参照值测定：采用采用考马斯亮蓝法测定校正样本中蛋白质浓度； (c)校正样本拉曼光谱的测定：将校正集样品置于拉曼光谱仪配套的比色皿架中进行扫描，获取校正样本拉曼特征光谱数据； (d)建立校正模型：采用多变量数据分析方法，建立校正集样本中蛋白质浓度与对应的拉曼特征光谱之间关系的数学模型，即为校正模型； (e)待测中药提取液检测：采集待测中药提取液的拉曼特征光谱数据，并将此光谱数据输入校正模型中，计算待测样本中蛋白质浓度。 9.一种根据权利要求1-8任一项所述的快速检测中药提取液中蛋白质浓度的方法在丹参提取液中蛋白质浓度的快速测定的应用。
所属类别：	发明专利