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原文传递菁染料在检测铅离子中的用途、铅离子检测试剂盒及方法

专利名称：	菁染料在检测铅离子中的用途、铅离子检测试剂盒及方法
摘要：	本发明提出了菁染料在检测铅离子浓度中的用途、铅离子检测试剂盒及方法。该方法包括：(1)将样本与菁染料、核酸适体混合；(2)将步骤(1)中所得到的混合物进行波谱检测；(3)基于波谱检测的结果，确定所述样本中是否存在铅离子及铅离子浓度。该检测专属性强和灵敏度高，对铅离子的检测限为200nM。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国科学院化学研究所
发明人：	沈刚;唐亚林;张虹;吴雨航
专利状态：	有效
申请日期：	2017-11-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201711145632.7
公开号：	CN109799197A
代理机构：	北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	赵天月
分类号：	G01N21/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	100190 北京市海淀区中关村北一街2号
主权项：	1.菁染料在检测铅离子浓度中的用途。 2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，进一步包括核酸适体。 3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述菁染料为具有式I所示的结构的化合物，其中，R1为C1～6烷基或任选被烷基取代的苯基； R2、R3、R4和R5分别独立地选自H或C1～6的烷基，或者R2和R3与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构，或者R4和R5与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构； R6和R7分别独立地为任选被磺酸基取代的C1～6烷基； X1和X2分别独立地选自C、O、S、Se或Te； Y为反离子，所述反离子是基于R6和R7所带电荷而选择的，任选地，当R6和R7为烷基时，Y为卤素阴离子；当R6和R7的至少之一携带磺酸根，不含Y；当R6和R7均携带磺酸根时，Y为三乙胺阳离子；任选地，所述菁染料为选自下列的式II、式III所示化合物的至少之一： 4.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述菁染料与所述核酸适体的摩尔比是1:(0.05～0.1)，任选地，所述核酸适体具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。 5.菁染料在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测铅离子浓度。 6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述试剂盒进一步包括核酸适体，任选地，所述核酸适体具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。 7.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述菁染料为式I所示的化合物，其中，R1为C1～6烷基或任选被烷基取代的苯基； R2、R3、R4和R5分别独立地选自H或C1～6的烷基，或者R2和R3与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构，或者R4和R5与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构； R6和R7分别独立地为任选被磺酸基取代的C1～6烷基； X1和X2分别独立地选自C、O、S、Se或Te； Y为反离子，所述反离子是基于R6和R7所带电荷而选择的，任选地，当R6和R7为烷基时，Y为卤素阴离子；当R6和R7之一携带磺酸根，不含Y；当R6和R7均携带磺酸根时，Y为三乙胺阳离子；任选地，所述菁染料为选自下列的式II、式III所示化合物的至少之一：任选地，所述试剂盒进一步包括缓冲液，任选地，所述缓冲液为Tris-HCl，任选地，所述缓冲液的pH值为5.0～8.2。 8.一种检测样本中铅离子浓度的方法，其特征在于，包括： (1)将样本与菁染料、核酸适体混合； (2)将步骤(1)中所得到的混合物进行波谱检测； (3)基于波谱检测的结果，确定所述样本中是否存在铅离子及铅离子浓度。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述波谱检测包括选自圆二色谱法、紫外光谱法、荧光光谱法的至少之一，优选地，所述波谱检测为圆二色谱检测，任选地，所述圆二色谱法的波长范围是200nm～700nm。任选地，在步骤(3)中，所述圆二色谱法检测结果中存在650nm峰是所述样本中存在铅离子的指示，优选地，基于所述650nm峰的面积，确定所述样本中铅离子的浓度，任选地，通过将所述650nm峰的面积与标准曲线进行比较，确定所述样本中铅离子的量，任选地，所述标准曲线是利用多个含有已知量铅离子的样本进行平行实验确定的。任选地，所述样本的pH是5.0～8.2，优选地，所述样本中铅离子的浓度至少为200nM。 10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述菁染料为式I所示的化合物，其中，R1为C1～6烷基或任选被烷基取代的苯基； R2、R3、R4和R5分别独立地选自H或C1～6的烷基，或者R2和R3与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构，或者R4和R5与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构； R6和R7分别独立地为任选被磺酸基取代的C1～6烷基； X1和X2分别独立地选自C、O、S、Se或Te； Y为反离子，所述反离子是基于R6和R7所带电荷而选择的，任选地，当R6和R7为烷基时，Y为卤素阴离子；当R6和R7之一携带磺酸根，不含Y；当R6和R7均携带磺酸根时，Y为三乙胺阳离子；任选地，所述菁染料为选自下列的式II、式III所示化合物的至少之一：任选地，所述菁染料与所述核酸适体的摩尔比是1:(0.05～0.1)，任选地，所述核酸适体具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，任选地，所述菁染料的浓度是4～16微摩尔/升，优选地，所述菁染料的浓度是12微摩尔/升，任选地，所述核酸适体的浓度为0.6～2微摩尔/升，优选地，所述核酸适体的浓度为1微摩尔/升。
所属类别：	发明专利