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利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法
| 专利名称： | 利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法，属于细胞因子的检测领域。利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法，该方法包括如下步骤：步骤一，利用细胞培养板，设置细胞密度及培养体系对细胞进行培养；步骤二，用药物处理细胞，通过优化刺激时间得到最强的信号；步骤三，收集细胞上清，若细胞上清需要稀释，则配置标准曲线；步骤四，将16ul细胞上清加入检测板中，加入4ul标记好的检测抗体混合液，室温孵育；步骤五，用酶标仪读数，并分别用各自标准曲线计算出样品中各细胞因子浓度。本发明的优点在于：提供了新的方法，实现了仅靠试剂就可以完成的多因子检测。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 上海;31 |
| 申请人： | 浠思(上海)生物技术有限公司 |
| 发明人： | 王维娜 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-02-15T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-05-24T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910116614.9 |
| 公开号： | CN109799353A |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 200131 上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区张衡路1299号2幢401室 |
| 主权项： | 1.利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法，其特征在于该方法包括如下步骤： 步骤一，利用细胞培养板，设置细胞密度及培养体系对细胞进行培养； 步骤二，用药物处理细胞，通过优化刺激时间得到最强的信号； 步骤三，收集细胞上清，若细胞上清需要稀释，则配置标准曲线； 步骤四，将16ul细胞上清加入检测板中，加入4ul标记好的检测抗体混合液，室温孵育，所述检测抗体混合液标记了HTRF荧光能量供体和受体，其中两个标记了HTRF荧光能量供体和受体的抗体便会以夹心法的形式结合在待测样品上； 步骤五，用酶标仪读数，并分别用各自标准曲线计算出样品中各细胞因子浓度。 2.根据权利要求1所述的利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法，其特征在于：在步骤一中，所述细胞培养板为96孔细胞培养板，所述细胞密度为每孔种植2.5-10万细胞，培养体系为50-100ul，或所述细胞培养板为24孔细胞培养板，所述细胞密度为每孔种植14-55万细胞，培养体系为500-1000ul，或 所述细胞培养板为16孔细胞培养板，所述细胞密度为每孔种植29-115万细胞，培养体系为1000-2000ul，或 所述细胞培养板为6孔细胞培养板，所述细胞密度为每孔种植70-280万细胞，培养体系为2500-5000ul。 3.根据权利要求1所述的利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法，其特征在于：在步骤二中，所述药物为激动剂或抑制剂。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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