专利名称: |
双黄连注射液中大分子物质的检测方法 |
摘要: |
本发明公开了双黄连注射液中大分子物质的检测方法,包括凝胶色谱法和MALDI‑TOF/TOF法,两种检测方法可以对实验结果进行相互验证,能够简单、快捷、全面的检测双黄连注射液中的大分子物质;从凝胶色谱法的结果可以得出3批次双黄连注射液中未检测出分子量超过5800的大分子;由MALDI‑TOF/TOF结果可以得出双黄连注射液中分子量超过m/z1000的物质相对峰面积很弱,离子强度大的集中在m/z100‑m/z300和m/z400‑m/z550。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
黑龙江;23 |
申请人: |
多多药业有限公司 |
发明人: |
蹇小兵;何翔;焦玉红 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2017-11-20T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-05-28T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201711203766.X |
公开号: |
CN109813811A |
分类号: |
G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
申请人地址: |
154007 黑龙江省佳木斯市东风区安庆街555号 |
主权项: |
1.双黄连注射液中大分子物质的两种检测方法,其特征在于该方法包括如下步骤: a.凝胶色谱法 色谱条件:色谱柱TSK GEL G2000SWXL 7.8*300mm;流动相8-12%乙腈溶液;流速0.8-1.0ml/min;柱温30-40℃;进样量10-20μl;检测波长214nm; 标准品溶液的制备:精密称取相对分子量为12300的细胞色素C对照品,置于量瓶中,加流动相溶解稀释至刻度,得终浓度为0.1-0.5mg/ml的溶液;精密称取相对分子量为5800的猪胰岛素对照品,置于量瓶中,加流动相溶解稀释至刻度,得终浓度为0.1-0.5mg/ml的溶液; 供试品溶液的制备:分别取不同批号的双黄连注射液,稀释3-8倍,即得供试品溶液; 测定方法:取标准分子量溶液和供试品溶液各10-20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,并根据各组分的峰面积按归一化法计算各组分的百分含量。 b.基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF) 仪器AB4700型MALDI-TOF/TOF;正离子模式;离子源加速电压10-30KV;检测条件N2激光源;波长337nm;激光频率:180-220HZ;离子延迟提取时间280-350ns;质谱信号单次扫描累加1800-2200次;使用peptide II standard kit(Bruker)离子峰校正(m/z400-m/z4000);质量扫描范围m/z100-m/z1000,m/z500-m/z5000;检测方式:线性方式(飞行管长1.6m);基质CHCA;将样品溶液与基质CHCA按0.5∶1~2∶1混匀后取1μl直接点靶;上线性正离子模式下检测。 2.如权利要求1所述的双黄连中大分子物质凝胶色谱检测方法,其特征在于该方法所述色谱条件为:色谱柱为TSK GEL G2000SWXL 7.8*300mm;流动相10%乙腈溶液;流速1.0ml/min;柱温35℃;进样量20μl;检测波长214nm。 3.如权利要求1所述的双黄连中大分子物质MALDI-TOF/TOF检测方法,其特征在于该方法所述的色谱条件为:仪器AB4700型MALDI-TOF/TOF;正离子模式;离子源加速电压20KV;检测条件N2激光源;波长337nm;激光频率:200HZ;离子延迟提取时间330ns;质谱信号单次扫描累加2000次;使用peptide II standard kit(Bruker)离子峰校正(m/z400-m/z4000);质量扫描范围m/z100-m/z1000,m/z500-m/z5000;检测方式:线性方式(飞行管长1.6m);基质CHCA;将样品溶液与基质CHCA按1∶1混匀后取1μl直接点靶;上线性正离子模式下检测。 |
所属类别: |
发明专利 |