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原文传递双黄连注射液中大分子物质的检测方法

专利名称：	双黄连注射液中大分子物质的检测方法
摘要：	本发明公开了双黄连注射液中大分子物质的检测方法，包括凝胶色谱法和MALDI‑TOF/TOF法，两种检测方法可以对实验结果进行相互验证，能够简单、快捷、全面的检测双黄连注射液中的大分子物质；从凝胶色谱法的结果可以得出3批次双黄连注射液中未检测出分子量超过5800的大分子；由MALDI‑TOF/TOF结果可以得出双黄连注射液中分子量超过m/z1000的物质相对峰面积很弱，离子强度大的集中在m/z100‑m/z300和m/z400‑m/z550。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	黑龙江;23
申请人：	多多药业有限公司
发明人：	蹇小兵;何翔;焦玉红
专利状态：	有效
申请日期：	2017-11-20T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201711203766.X
公开号：	CN109813811A
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	154007 黑龙江省佳木斯市东风区安庆街555号
主权项：	1.双黄连注射液中大分子物质的两种检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤： a.凝胶色谱法色谱条件：色谱柱TSK GEL G2000SWXL 7.8300mm；流动相8-12％乙腈溶液；流速0.8-1.0ml/min；柱温30-40℃；进样量10-20μl；检测波长214nm；标准品溶液的制备：精密称取相对分子量为12300的细胞色素C对照品，置于量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，得终浓度为0.1-0.5mg/ml的溶液；精密称取相对分子量为5800的猪胰岛素对照品，置于量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，得终浓度为0.1-0.5mg/ml的溶液；供试品溶液的制备：分别取不同批号的双黄连注射液，稀释3-8倍，即得供试品溶液；测定方法：取标准分子量溶液和供试品溶液各10-20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，并根据各组分的峰面积按归一化法计算各组分的百分含量。 b.基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF) 仪器AB4700型MALDI-TOF/TOF；正离子模式；离子源加速电压10-30KV；检测条件N2激光源；波长337nm；激光频率：180-220HZ；离子延迟提取时间280-350ns；质谱信号单次扫描累加1800-2200次；使用peptide II standard kit(Bruker)离子峰校正(m/z400-m/z4000)；质量扫描范围m/z100-m/z1000，m/z500-m/z5000；检测方式：线性方式(飞行管长1.6m)；基质CHCA；将样品溶液与基质CHCA按0.5∶1～2∶1混匀后取1μl直接点靶；上线性正离子模式下检测。 2.如权利要求1所述的双黄连中大分子物质凝胶色谱检测方法，其特征在于该方法所述色谱条件为：色谱柱为TSK GEL G2000SWXL 7.8300mm；流动相10％乙腈溶液；流速1.0ml/min；柱温35℃；进样量20μl；检测波长214nm。 3.如权利要求1所述的双黄连中大分子物质MALDI-TOF/TOF检测方法，其特征在于该方法所述的色谱条件为：仪器AB4700型MALDI-TOF/TOF；正离子模式；离子源加速电压20KV；检测条件N2激光源；波长337nm；激光频率：200HZ；离子延迟提取时间330ns；质谱信号单次扫描累加2000次；使用peptide II standard kit(Bruker)离子峰校正(m/z400-m/z4000)；质量扫描范围m/z100-m/z1000，m/z500-m/z5000；检测方式：线性方式(飞行管长1.6m)；基质CHCA；将样品溶液与基质CHCA按1∶1混匀后取1μl直接点靶；上线性正离子模式下检测。
所属类别：	发明专利