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原文传递甲钴胺注射液有关物质的HPLC检测方法

专利名称：	甲钴胺注射液有关物质的HPLC检测方法
摘要：	本发明公开了一种甲钴胺注射液有关物质的HPLC检测方法。本发明HPLC检测方法以266nm的波长为检测波长，能够更充分的将杂质分离出来；该方法在流动相中加入了离子对试剂，增强了分析物在色谱柱上的保留时间，并采用优化的梯度洗脱程序进行洗脱，分析出的杂质个数多，经酸、碱、热、氧、光等破坏试验证明被分析物中各已知杂质和未知杂质能够彻底分离。本发明提供的HPLC检测方法专属性强，灵敏度和准确度高，方法耐用性好，同时采用外标法对氰钴胺和羟钴胺两个已知杂质进行限度控制，更能够确保注射液的安全、有效，质量可控。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	黑龙江;23
申请人：	哈尔滨三联药业股份有限公司
发明人：	任萃文;王萍萍;孙维扬;姚烁;胡玉庆;黄薇薇;陆勇;葛影;佟智慧;朱明艳;张宇;卢立波
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-11T00:00:00+0800
申请号：	CN201910503358.9
公开号：	CN110320290A
代理机构：	北京思元知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	余光军;曾晖
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	150025 黑龙江省哈尔滨市利民开发区北京路
主权项：	1.一种甲钴胺注射液有关物质的HPLC检测方法，包括：将待检测的物质上色谱柱后以流动相进行梯度洗脱，对洗脱产物进行检测并进行定位定量；其特征在于：所述检测时的检测波长为220-380nm，优选为266nm。 2.按照权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述流动相由流动相A和流动相B组成；其中，流动相A由缓冲盐溶液和乙腈按照85:15的体积比组成，流动相B为乙腈。 3.按照权利要求2所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述的缓冲盐溶液的pH值为4.0～7.0；优选的，所述的缓冲盐溶液为磷酸盐缓冲溶液；更优选的，所述磷酸盐缓冲溶液为磷酸二氢钾溶液，最优选为浓度0.02～0.15mol/L磷酸二氢钾溶液。 4.按照权利要求2所述的HPLC检测方法，其特征在于，在缓冲盐溶液中加入离子对试剂；优选的，所述的离子对试剂是已烷磺酸钠、戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠或癸烷磺酸钠中的任何一种。 5.按照权利要求4所述的HPLC检测方法，其特征在于，所加入的离子对试剂在缓冲盐溶液中的终浓度为0.025mol/L。 6.按照权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述HPLC检测条件包括：采用C18色谱柱为液相色谱柱，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。 7.按照权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述的梯度洗脱程序如下：时间0min，流动相A：100％，流动相B：0％；时间5min，流动相A：97％，流动相B：3％；时间10min，流动相A：90％，流动相B：10％；时间30min，流动相A：90％，流动相B：10％；时间35min，流动相A：100％，流动相B：0％；时间40min，流动相A：100％，流动相B：0％。 8.按照权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述的洗脱的流速为1.2～1.5ml/min；色谱柱的柱温为30℃。 9.按照权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，采用外标法对有关物质进行定位定量。 10.按照权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于，所述的有关物质包括甲钴胺、氰钴胺以及羟钴胺。
所属类别：	发明专利