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原文传递通过质谱分析用复用内标物对蛋白质和蛋白质修饰的绝对定量

专利名称：	通过质谱分析用复用内标物对蛋白质和蛋白质修饰的绝对定量
摘要：	本发明涉及通过质谱分析用复用内标物对蛋白质和蛋白质修饰的绝对定量，具体涉及一种通过质谱分析进行绝对蛋白质或肽定量的方法。制备含有目的蛋白质或肽的样品用于质谱分析。使所述样品经历低分辨率下的质谱分析，由此获得单累加质谱分析峰，然后使其经历高分辨率质谱分析，由此获得多个质谱分析峰。通过与内标物集合比较或通过使用针对每个同位素物集合生成的标准曲线，对所述多个质谱分析峰中的每一者的强度进行定量。使用标准曲线进行定量促进了跨越分析物的动态范围的定量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	皮尔斯生物科技有限公司
发明人：	G·赫曼森;J·C·罗杰斯;J·洛埃特;R·D·伯姆加登;B·帕特尔
专利状态：	有效
申请日期：	2014-06-06T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910110645.3
公开号：	CN109813914A
代理机构：	中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
代理人：	张小勇
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	美国伊利诺斯
主权项：	1.一种组合物，其包含以重同位素标记的多种分离肽的至少一个第一预混合集合，其中所述集合内的每种肽具有相同氨基酸序列和相同标称质量，并且所述集合内的肽相差毫道尔顿质量亏损，所述质量亏损通过在氨基酸序列内的不同原子上以重同位素与所述序列的固定比例并入重同位素而产生，其中所述重同位素选自13C-、15N-、18O-、34S-或2H-。 2.根据权利要求1所述的组合物，其进一步包含用重同位素标记的多种分离肽的至少一个额外预混合集合，所述集合与第一集合具有不同的氨基酸序列，其中每个额外集合内的肽具有相同氨基酸序列和相同标称质量，并且所述集合内的肽相差毫道尔顿质量亏损，所述质量亏损通过在氨基酸序列内的不同原子上并入重同位素而产生，其中所述重同位素选自13C-、15N-、18O-、34S-或2H-。 3.根据权利要求1所述的组合物，其中至少一个第一集合中的重同位素标记的肽以不同浓度存在。 4.根据权利要求3所述的组合物，其中至少一个额外集合中的重同位素标记的肽以不同浓度存在。 5.一种质谱(MS)校准方法，所述方法包括使用以重同位素标记的多种分离肽的至少一个第一预混合集合基于毫道尔顿质量亏损生成用于MS分析的校准曲线，其中第一集合内的每种重同位素标记的肽具有相同氨基酸序列和相同标称质量，并且所述集合内的肽相差毫道尔顿质量亏损，所述质量亏损通过在氨基酸序列内的不同原子上以重同位素与所述序列的固定比例并入重同位素而产生，其中所述重同位素选自13C-、15N-、18O-、34S-或2H-；和以高分辨率MS分离混合的重同位素标记的肽，并使用所述分离结果用于MS校准。 6.一种质谱(MS)校准方法，所述方法包括将单个肽组合物注射到与质谱检测系统联接的第一液相色谱(LC)柱，所述单个肽组合物包含以重同位素标记的多种分离肽的至少一个第一集合，其中第一集合内的每种重同位素标记的肽具有相同氨基酸序列和相同标称质量，并且进一步地，其中第一集合内的每种重同位素标记的肽相差毫道尔顿质量亏损，所述质量亏损通过在至少一个氨基酸分子内的不同原子上并入重同位素而产生，其中所述重同位素选自13C-、15N-、18O-、34S-或2H-；通过质谱分析共洗脱的肽组合物中的每种肽；从注射到LC柱的单个肽组合物生成所述分析的至少第一校准曲线；和使用至少第一稀释曲线的结果评定MS设备的灵敏度。 7.根据权利要求5所述的方法，其中至少一个第一集合中的每种重同位素标记的肽以不同浓度存在。 8.根据权利要求5所述的方法，其中在以高分辨率MS分离之前以低分辨率MS分离混合的重同位素标记的肽。 9.根据权利要求5所述的方法，其中所述校准曲线是标准曲线。 10.根据权利要求5所述的方法，其中所述校准曲线是稀释曲线。 11.根据权利要求6所述的方法，其中至少一个第一集合中的每种重同位素标记的肽以不同浓度存在。 12.根据权利要求6所述的方法，其中所述校准曲线是标准曲线。 13.根据权利要求6所述的方法，其中所述校准曲线是稀释曲线。
所属类别：	发明专利